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B7-H4在肾癌细胞核内表达及其核定位序列对HEK293细胞在SCID小鼠体内成瘤的影响中文摘要目的：以临床肾癌组织标本为研究对象，检测B7-H4在肾癌细胞的核内表达情况，并分析其与临床特征之间的相关性；应用B7-H4野生型（B7-H4WT）及B7-H4核定位突变体(B7-H4H250QMT)转染细胞株接种SCID小鼠，研究B7-H4核定位序列对HEK293细胞成瘤的影响，并初步探讨其对肿瘤发展的机制。方法：用免疫组化染色方法测定82例临床肾癌标本中B7-H4在细胞内的表达情况，并采集临床资料，分析B7-H4与肾癌临床病例特征之间的关系；分别采用本实验室成功构建并证实有B7-H4核定位的HEK293细胞（简称B7-H4WT/293）和B7- H4核定位突变体HEK293细胞（简称B7-H4H250QMT/293）接种到SCID(严重联合免疫缺陷)小鼠的皮下，并以HEK293细胞作为对照（简称Mock/293），建立动物模型：将24只SCID小鼠随机分配成3组，在小鼠双侧腋下分别注射不同细胞，每侧接种的细胞量约为2×107个。8周后处死小鼠，测量比较各组瘤体的体积和质量，并进行免疫组化染色方法检验瘤体组织内B7-H4的表达情况。结果：1.B7-H4在肾癌的细胞膜、胞浆及胞核内都有表达；细胞核内和细胞表面B7- H4的表达水平与肾癌的分级、TNM分期、细胞核分级呈正相关性（p0.05），而与患者的性别、年龄、有无临床症状、肿瘤的大小、淋巴结转移无明显相关性(p0.05)。2.SCID小鼠皮下成瘤实验结果显示：B7-H4WT/293组瘤体与B7-H4 H250QMT/293组和Mock/293组瘤体相比，体积大（175.2±118.4mm3 vs 64.0±62.9mm3，70.8±42.2mm3 ，p0.05），质量重（96.5±46.0mgvs35.9±28.7mg，43.8±28.6mg，p0.05），差异有统计学意义；而B7-H4H250QMT/293组和Mock/293组相比瘤体的体积和质量无明显差别（P0.05）。3.瘤体免疫组化结果显示，B7-H4WT/293组B7-H4在细胞膜、胞浆、及细胞核内均有高表达，细胞核内阳性表达率93.75%（15/16），而B7-H4H250QMT/293组和Mock/293组B7-H4细胞核内阳性表达率均为0。结论：B7-H4在肾癌中核内的高表达与患者的临床预后指标有明显相关，而B7-H4 蛋白核定位显著促进了HEK293细胞在SCID小鼠体内生长，提示B7-H4分子可以作为肾癌患者病情评估以及预后判断的分子生物学指标。探讨B7-H4在肿瘤细胞中的表达和核定位分子机制，有可能对肾癌的临床诊断与治疗具有指导意义。关键词：B7-H4；肾癌；核定位；模型作者：崔伟指导老师：孙传洋章良Thenuclearexpression ofB7-H4inrenalcellcarcinoma andthe effectofB7-H4nuclear localizationsequenceon HEK293cellsgrowthinSCIDmiceAbstractObjective:ToinvestigatetheexpressionofB7-H4inthenucleusofrenalcellcarcinoma andtherelationshipbetweentheB7-H4expressionlevelandtheclinicopathological characteristics;ConstructionofSCIDmicetransplantationtumormodelusingthewildtypeofB7-H4cells（B7-H4WT）andthe mutantcellsofnuclearlocalizationofB7-H4cells(B7-H4H250QMT), thentostudytheeffectofB7-H4nuclearlocalizationsequence onHEK293cells growth.Methods:Collected82cases ofsurgicalresectionofrenalcellcarcinomaspecimens as the experimentalgroup,usethemethodofimmunohistochemicaltodetecttheexpressionof proteinlevels,andcollectedclinicaldatatoanalysisoftherelationshipbetweentheir localizationofexpressing;Weimplantedcellsinseverecombined