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B7-H4 在膀胱尿路上皮癌中的表达及其与免疫逃逸机制的实验研究摘要目的：1、探讨 B7-H4 在膀胱尿路上皮癌组织及血清中的表达及其临床意义；2、研究封闭 B7-H4 通路对活化的 T 淋巴细胞体外抗膀胱癌 BIU-87 细胞作用的 影响。方法：1、1.1 采用免疫组织化学染色方法检测 49 例膀胱尿路上皮癌患者癌组织及对应 癌旁组织中 B7-H4 蛋白的表达，观察 B7-H4 蛋白的表达水平与患者临床病理 指标之间的相关性；1.2 酶联免疫吸附试验（ELISA）检测 45 例膀胱尿路上皮癌患者和 45 例健康 对照组血清中可溶性 B7-H4 蛋白（sB7-H4）表达量变化，观察 sB7-H4 的表 达水平与患者临床病理指标之间的相关性；2、2.1 细胞免疫化学染色方法检测膀胱癌 BIU-87 细胞 B7-H4 的表达；2.2 体外分离、纯化和活化 T 淋巴细胞；2.3B7-H4 单克隆抗体封闭 BIU-87 细胞，细胞增殖/毒性检测法（CCK-8 法） 检测封闭 B7-H4 通路后活化的 T 淋巴细胞对 BIU-87 细胞的细胞毒作用影响。结果：1、1.1 膀胱尿路上皮癌组织中 B7-H4 阳性表达率为(24/49) 49.0%，而癌旁膀胱 组织中无 B7-H4 蛋白的表达(P＜0.05)，其表达与患者的肿瘤 TNM 分期和组 织学分级密切相关，肌层浸润组和组织学高分级组分别显著高于非肌层浸润 组和低分级组(P＜0.05)。1.2 膀胱尿路上皮癌患者血清中 sB7-H4 的浓度较正常人显著提高(P＜0.05)， 组织学分级高分级的患者表达量显著高于低分级患者（P＜0.05）；2、2.1 膀胱癌 BIU-87 细胞上有 B7-H4 蛋白的表达；2.2 体外成功分离、纯化并活化出 T 淋巴细胞；2.3 封闭 B7-H4 通路后活化的 T 淋巴细胞对 BIU-87 细胞的杀伤活性明显较未封闭组增强（P＜0.05），且呈剂量依赖性。 结论：B7-H4 在膀胱尿路上皮癌患者癌组织及血清中表达上调，与患者 TNM 分期 及组织学分级密切相关，在膀胱尿路上皮癌的发生发展及免疫逃逸中发挥着重要 作用，封闭肿瘤组织中的 B7-H4 有可能干预膀胱尿路上皮癌的复发与进展。【关键词】膀胱尿路上皮癌， B7-H4， 肿瘤免疫Experimental Study of B7-H4 Expression in Bladder Urothelial Carcinoma and Immune Escape MechanismsAbstract Objective：1、To investigate Expression and clinical significance of B7-H4 in tissue and serum ofpatients with bladder urothelial carcinoma；2、To study the effects of activated T lymphocytes in vitro Cytotoxicity to bladder cancer BIU-87 cells after closing B7-H4 pathway.Methods:1、1.1 The expression of B7-H4 in 49 cases was detected by immunohistochemical method, the relationship between the expression and clinical pathological parameters of bladder urothelial carcinoma was also analyzed；1.2 the levels of sB7-H4 in 45 cases together with 45cases of healthy volunteers were detected by ELISA，the relationship between the levels and clinical pathological parameters of bladder urothelial carcinoma was also analyzed；2、2.1 The expression of B7-H4 in bladder cancer BIU-87 cells was detected by Immunocytochemical staining method；Separation, purification and activation of T lymphocytes in vitro；the effects of a