dal 1基因的蛋白表达及其点突变1810ct575cystyr与非小细胞肺癌转移的关系word格式论文.docxVIP

组织 DAL-1 基因 1810CT/575CysTyr 点突变的检测，分析其与 DAL-1 蛋白表达的关系，进一步探讨 DAL-1 蛋白表达缺失的原因。方法一、免疫组化方法检测石蜡包埋的 NSCLC 组织 167 例（其中 149 例备有配 对癌旁组织）的 DAL-1 蛋白表达，分析其与 NSCLC 临床病理因素的关系。数据 采用 χ2 检验进行统计学分析。二、提取 204 例 NSCLC 患者配对组织标本（石蜡包埋 NSCLC 组织和同一 患者正常淋巴结组织）及 112 例 NSCLC 患者新鲜血液标本（共 316 例）基因组 DNA，PCR-RFLP 方法检测 DAL-1 基因 1810 CT 基因型，分析 1810 CT 点突 变与 DAL-1 蛋白表达及 NSCLC 转移的关系。数据采用 χ2 检验进行统计学分析。结果一、167 例 NSCLC 组织中，DAL-1 蛋白阳性表达 97 例（58.1%），阴性 70 例（41.9%）。其中 149 例 NSCLC 配对标本中，癌旁组织 DAL-1 阳性表达 135 例（90.6%），阴性 14 例（9.4%）；癌组织 DAL-1 阳性表达 87 例（58.4%），阴 性 62 例（41.6%）；NSCLC 癌组织 DAL-1 阳性表达率显著低于癌旁组织（p＜0.05）。二、167 例 NSCLC 组织中，DAL-1 蛋白表达阳性率在肿瘤最大直径≤3cm组(47/66)显著高于肿瘤最大直径＞3cm 组(50/101（)p＜0.01），未发生转移组(64/78)显著高于转移组(33/89（)p＜0.000），Ⅰ期、Ⅱ期(67/91)显著高于Ⅲ期、Ⅳ期(30/76)（p＜0.000）。其中 148 例腺癌和鳞癌 DAL-1 蛋白表达阳性率高、中分化组(63/93)显著高于低分化组(27/55)（p＜0.005）。三、316 例 NSCLC 患者 DAL-1 1810 CT 基因型分布：野生型基因型 TT293 例（92.7%），突变型基因型 23 例，突变率为 4.1%。其中 CT20 例（6.3%），CC3 例（0.9%）。204 例 NSCLC 患者正常淋巴结组织与其 NSCLC 组织配对资料共 408 个标本基因型检测结果表明：各例 NSCLC 肿瘤组织和相应正常淋巴结组织基因 型完全一致。四、167 例 NSCLC 组织中，发生 DAL-1 1810 CT 点突变者 13 例。13 例发 生点突变患者的癌组织中 DAL-1 蛋白阳性表达 5 例，阴性 8 例；相应的癌旁组 织 DAL-1 蛋白阳性表达 7 例，阴性 5 例，1 例无配对癌旁组织。5 例点突变患者癌组织 DAL-1 蛋白虽阳性表达，但均发生转移。提示 DAL-1 1810 CT 点突变可能削弱 DAL-1 对肿瘤转移的抑制作用。五、在 316 例标本中，突变的 23 例中 17 例发生转移，6 例未发生转移；在 293 例野生型的标本中，149 例发生转移，144 例未发生转移，NSCLC 转移在 DAL-1 突变型与野生型组间差异有统计学意义（p0.025）。提示 DAL-1 1810 CT 点突变可能导致 NSCLC 更容易发生转移。六、分析经免疫组化方法检测蛋白表达的 167 例 NSCLC 组织 DAL-1 1810 CT 点突变与肿瘤临床病理因素关系发现，DAL-1 1810 CT 点突变基因型分布 频率在肿瘤最大直径≤3cm 组（6/66）与肿瘤最大直径＞3cm 组（7/101），Ⅰ期、 Ⅱ期组（8/91）与Ⅲ期、Ⅳ期组（5/76），组间无显著性差异（P＞0.05）。DAL-1 1810 CT 点突变基因型分布频率在转移组（11/89）与无转移组（2/78）间有显 著性差异（P＜0.025）结论一、人 NSCLC 肿瘤组织存在 DAL-1 蛋白表达降低、缺失现象。 二、NSCLC 转移组的 DAL-1 蛋白表达阳性率显著低于未转移组，提示 DAL-1蛋白表达降低、缺失可能与 NSCLC 转移有关。三、人 NSCLC 组织中 DAL-1 1810 CT 突变率为 4.1%。DAL-1 1810 CT点突变不是导致 DAL-1 蛋白表达降低、缺失的主要原因。DAL-1 1810 CT 点突 变可能与 NSCLC 转移有关，尚需用基因定点突变技术进一步证实。关键词： DAL-1；非小细胞肺癌；点突变；转移The Association of DAL-1 Protein Expressi- on and Point Mutation (1810 CT/575Cys Tyr) with the Metastasis of None Small Cell Lung CancersAbstractObj