dba2小鼠内耳增龄性退变及其发病机制的探讨word格式论文.docxVIP

英文缩略词表英文缩略AHL英文全称Age-related hearing loss中文对照老年性听力损失HEhematoxylin and eosin stainHE 染色mtDNA COXIII ABR PCR CD ROS OHC IHC SGC CTbp rpmPBSMitochondrial DNA cytochrome coxidase III Acoustic brainstem response Polymerase chain reaction Common deletionReactive oxygen species Out hair cellInner hair cell Spiral ganglion cell Threshold cycle Base pairRound per minutephosphate buffer sodium线粒体 DNA细胞色素 C 氧化酶 III 听性脑干反应 聚合酶链反应 普遍缺失活性氧簇 外毛细胞 内毛细胞 螺旋神经节细胞 循环阈值碱基对 每分钟转数 磷酸盐缓冲液中文摘要【目的】观察 DBA/2 小鼠耳蜗的早老性改变并探讨其发病机制。【方法】3 周龄、8 周龄、12 周龄、8 月龄的 DBA/2 小鼠各 20 只，听性脑干反应（ABR）检测其听阈。耳蜗基底膜铺片观测内外毛细胞形态及数量。HE 染色检测螺旋 神经节细胞形态及数量。实时定量 PCR 技术检测内耳线粒体 DNA3873bp 缺失突变率及 内耳 COXⅢ基因表达量。免疫荧光定位检测 COXⅢ蛋白在内耳的定位表达。【结果】DBA/2 小鼠 ABR 阈值随年龄增加而提高，不同时间点 DBA/2 小鼠听阈差 异有显著性意义（P0.01）。随年龄增加，从底回到顶回内毛细胞和外毛细胞缺失也 会随之增加，底回表现尤为明显；螺旋神经节细胞随年龄的增加计数减少，其中 8 月 龄与其它周龄差异有显著性意义(P0.05)，3 周、8 周、12 周之间差异无统计学意义（P0.05）。耳蜗线粒体 DNA3873bp 大片段缺失率为 10-4～10-5 ，各年龄组之间缺失 率差异无统计学意义（P0.05）。COXⅢ蛋白主要在耳蜗的螺旋神经节表达，各年龄组 COX3 基因缺失率无明显差异（P0.05）。【结论】①国产 DBA/2 小鼠耳蜗的早老性改变可作为研究老年性耳聋的动物模型。②DBA/2 小鼠耳蜗中存在线粒体 DNA3873bp 缺失突变及 COXⅢ基因的缺失，但其早老 性改变与线粒体 DNA3873bp 缺失突变及 COXⅢ基因缺失率无明显线形关系。【关键词】DBA/2小鼠；线粒体；耳蜗；老化；细胞色素氧化酶ⅢABSTRACTObjective: To detect the age-related morphology changes and pathogenesis in the co- chlea of DBA/2 mice.Method: DBA/2 mice were divided into four groups:3 weeks group(n=20);8 weeks group(n=20); 12 weeks group(n=20); 8 months group(n=20).Auditory brainstem response (ABR) was used to detect the hearing threshold of DBA/2 mice in different time points. Thefrequency of mtDNA3873bp deletion and COXⅢ genes express were detected by real-timePCR. Morphological examination was taken to observe hair cells and spiral ganglion cells(SGC) of cochlear. Immunofluorescence method was to test the expression of COXⅢin cochlear of DBA/2 mice.Results: With the growth of age, ABR threshold incresed and the difference of ABR threshold among all groups were significant(P0.01). With the growth of age, The HC loss incresed and SGC counts decresed. At eight month point, the HC an