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Db-cAMP 对放射激活的小胶质细胞 BV-2 表型的影响华中科技大学同济医学院附属协和医院肿瘤中心 研究生： 陈名实导师： 刘莉 教授中文摘要目的研究不同剂量浓度的 db-cAMP 干预后，放射激活的小胶质细胞 BV-2 炎症因子分 泌谱的变化，初探 db-cAMP 对放射激活的小胶质细胞 BV-2 表型的影响。方法培养的 BV-2 细胞照射前半小时，分别使用浓度为 0μM、10μM、30μM、100μM 的db-cAMP 处理，行 10Gy 照射后，于 1h、3h、6h、12h、24h、48h 分别收集上清液和细 胞。用 ELISA 法测定上清液中 TNF-α、IL-12、IL-13、IL-10 的浓度，应用实时荧光定量 PCR 测定小胶质细胞 iNOS、COX-2、IL-12、IL-13、IL-10 mRNA 表达。结果：1.辐射后，体外培养的 BV-2 细胞上清中，TNF-α、IL-12 浓度明显升高， 而 IL-10和 IL-13 的浓度无明显变化。2.辐射后，BV-2 细胞 iNOS、COX-2、IL-12 的 mRNA 表达升高，而 IL-10 和IL-13mRNA 的表达无明显变化。3. db-cAMP 作用后，辐射激活的 BV-2 细胞上清中 TNF-α、IL-12 浓度明显下降，IL-10、IL-13 的浓度明显升高，并呈时间和剂量依赖性。4．db-cAMP 可抑制辐射激活的 BV-2 细胞 iNOS、COX-2、IL-12mRNA 表达，但可促进 IL-10、IL-13mRNA 的表达。结论辐射后BV-2细胞高表达促炎因子TNF-α、IL-12和iNOS、COX-2，呈M1型。db-cAMP 可诱导辐射激活的BV-2细胞低表达促炎因子，高表达抗炎因子IL-10和IL-13，呈M2型。关键词db-cAMP、小胶质细胞 BV-2、细胞表型、电离辐射Regulationofphenotypebydibutyryl-cAMPin irradiation-stimulated murine BV2 microglial cellsCandidateChen Ming shi SupervisorProfessor Liu LiABSTRACTAIMSThe aim of the present study was to determine the role of dibutyryl-cAMP on cell phenotype in a murine macroglial cell line (BV-2cells) stimulated by irradiation.METHORDSBV-2 cells were pretreated with db-cAMP for 30 min, with concentration of 0μM, 10μM, 30μM, 100μM respectively. Then cells were irradiated with a single dose of 10Gy, 1h, 3h, 6h, 12h, 24h, 48h later, supernatants and cells were collected. ELISA was used to determine the concentrations of TNF-α, IL-12, IL-13, IL-10 in the supernatants. and iNOS, COX-2, IL-12, IL-13, IL -10 mRNA expression in microglia were detected by fluorescence quantitative PCR.RESULTThe concentrations of TNF-α and IL-12 in the supernatants increased significantly after irradiation, but no significant changes were observed in IL-13 and IL-10 .Radiation led to significant increases in gene expression of the proinflammatory cytokines IL-12, iNOS and COX-2 postirradiation, while IL-13 and IL-10 mRNA had no such changes.Db-cAMP dramatically decreased the concentrations of TNF-α and IL-12 in the supernat