原创力文档主要内容
细胞结构与功能：
?生物膜与细胞器的研究
细胞质膜、内膜系统、线粒体等
?细胞骨架体系的研究
微丝、微管、中间纤维、Septin
?细胞核、染色体
? 细胞连接与细胞外基质
细胞重要生命活动：
?细胞增殖及其调控
?细胞分化与肿瘤细胞
?细胞凋亡 ;第一章 绪 论
细胞生物学概念:
细胞生物学是以细胞为研究对象, 从显微水平、亚显微水平、分子水平等三个层次，以动态的观点, 研究细胞和细胞器的结构和功能、细胞的起源与进化和各种生命活动规律的学科。
细胞学说的建立和内容:
一切生物体都是由细胞组成的；
细胞是生命的基本组成单位；
一切细胞只能来自原来的细胞(的分裂)
第一个利用显微镜观察细胞的人：英国人胡克/Robert Hooke
第一个利用显微镜观察到活细胞的人：荷兰学者列文虎克/Leeuwenhoek
提出者：德国的植物学家施莱登/Schleiden、动物学家施旺/Schwann
病理学家魏尔肖/Rudolf Virchow进行补充。;
细胞是生命活动的基本单位：
一切有机体都是由细胞构成，细胞是生命体的基本构成单位；
细胞具有独立的、有序的自控代谢体系，细胞是代谢与功能的基本单位；
细胞是有机体生长与发育的基础；
细胞是遗传的基本单位，细胞具有遗传的全能性；
没有细胞就没有完整的生命。
;支原体是最小最简单的细胞，只有唯一的细胞器核糖体，直径只有0.1-0.3μm。自然界中最小最简单的生命体是病毒。蓝细菌是已知的世界上最古老的生命体
根据核酸类型不同，病毒可以分为两大类：DNA病毒、RNA病毒
根据宿主范围可分为: 动物病毒、植物病毒、细菌病毒（噬菌体）等。
一个细胞生存和增殖必须具备的结构装置与机能是：
1). 生物膜系统；
2). 遗传信息表达结构体系；
3). 细胞骨架系统。
细胞体积大小上限一般为数百微米，下限为100nm ，其决定因素有：
1. 核质比；
2. 物质交流和运输的效率；
3. 体积表面积比。;;第二章 细胞生物学研究方法
;普通光学显微镜以可见光为光源，荧光显微镜的光源是以紫外线为光源，而电子显微镜是以电子束为光源。
电子显微镜按工作原理和用途的不同可分为透射电镜和扫描电镜。扫描电镜：观察样品表面的结构特征； 透射电镜：观察样品的内部精细结构。
;R = 0.61 λ/n Sinα= 0.61 λ/NA ;显微镜类型 分辨本领 光源 透镜 成像原理;荧光共振能量转移：
荧光共振能量转移是指两个荧光发色基团在足够靠近时，当供体分子吸收一定频率的光子后被激发到更高的电子能态，在该电子回到基态前，通过偶极子相互作用，实现了能量向邻近的受体分子转移（即发生能量共振转移）。可用于研究活细胞生理条件下研究蛋白质-蛋白质间相互作用及其发生的时空性。如果两个蛋白质分子的距离在10nm之内，一般认为这两个蛋白质分子存在直接相互作用。
荧光漂白恢复技术：
以高能量激光束的照射使细胞特定区域的荧光发生不可逆的淬灭（漂白），随后其它区域的荧光标记分子会运动到漂白区（恢复），可以用来检测活细胞表面或细胞内部分子的运动以及在各种结构上分子动态变化率。
;主要电镜制样技术：
超薄切片技术(ultrathin section)
分辨率5nm
负染技术(negative staining)
分辨率1.5nm
冰冻蚀刻技术(freeze etching)
快速冷冻深度蚀刻技术(quick freeze deep etching)
低温电镜技术(cryoelectron microscopy) ;超薄切片：
电子束穿透力很弱，须将标本制成40-50nm（小于100nm）的超薄切片。
方法：
透射电镜观察的组织细胞样本在超薄切片之前常用戊二醛和四氧化锇双重固定；丙酮逐渐脱水；环氧树脂包埋；切片；采用柠檬酸铅和醋酸双氧铀等进行染色。
透射电镜的样品制备包括固定、脱水、包埋、切片、染色五个步骤。
;冰冻蚀刻技术/Freeze etching：
首先用快速低温冷冻法将样品迅速冷冻，然后在低温下使相对脆弱部位断裂，用铂、金等金属进行倾斜喷镀，再垂直于断面进行碳真空喷镀，形成一层连续的碳膜，最后将样品本身消化，在电镜下观察碳膜和金属“铸型”。冰冻蚀刻技术主要用于观察膜断裂面的蛋白质颗粒和膜面结构。
深度蚀刻主要用于观察胞质中的细胞骨架纤维及其结合蛋白。
负染技术/negative staining ：
文档评论（0）