分子生物学许晓东2 NXPowerLite-.pptVIP

2 染色体与 DNA;2.1 染色体;2.1.1 染色体概述;人类染色体显微结构图;2.1.2 真核细胞染色体的组成;;组蛋白的特性 1. 进化上的极端保守性 特别是H3、H4，牛、猪、大鼠的H4完全相同 2. 无组织特异性 仅发现两个例外（鸟鱼两栖红细胞H1-H5，精细胞鱼精蛋白） 3. 肽链上氨基酸分布的不对称性 N端碱性氨基酸 C端疏水氨基酸 4. 组蛋白的修饰作用 甲基化、乙酰化、磷酸化、ADP核糖基化等 5. 富含赖氨酸的组蛋白H5 只存在于鸟类、两栖类等含有细胞核的红细胞中 非组蛋白（含量约为组蛋白的60-70%） 包括酶类和细胞分裂有关的蛋白（收缩蛋白、骨架蛋白、核孔复合物蛋白、肌动蛋白、肌球蛋白、微管蛋白、原肌蛋白） 高速泳动蛋白（high mobility group protein, HMG蛋白）能与DNA结合，也能与H1作用，可能与超螺旋结构有关。 DNA结合蛋白 可能是一些与DNA复制或转录有关的酶或调解物质。 A24非组蛋白 C端与H2A相同，功能不详;2. 真核生物基因组DNA;不重复序列 一个或几个拷贝，占DNA总量的40-80%，序列长约750-2000bp. 单拷贝基因也可以合成大量蛋白： 蚕丝心蛋白 DNA — 104 mRNA — 109 protein 中度重复序列 重复次数10-104，占DNA总量的10-40%，编码rRNA、tRNA和某些结构蛋白。 高度重复序列 卫星DNA(satellite DNA )，占基因组的10-60%，由6-100个碱基组成，大多位于染色体着丝粒，功能不明，可能与染色体的稳定性有关。;3. 染色质和核小体;核小体是一种串珠状结构，由核心颗粒和连结线DNA两部分组成，可描述如下：①每个核小体单位包括约200bp的DNA、一个组蛋白核心和一个H1；②由H2A、H2B、H3、H4各两分子形成八聚体，构成核心颗粒；③DNA分子以左手螺旋缠绕在核心颗粒表面，每圈80bp，共1.75圈，约146bp，两端被H1锁合；④相邻核心颗粒之间为一段60bp的连接线DNA。;;真核生物基因组的结构特点 基因组庞大 存在大量重复序列 大部分为非编码序列（90%） 转录产物为单顺反子(见下页解释) 真核基因是断裂基因，有内含子 存在大量顺式作用元件（启动子、增强子、沉默子） 存在大量的DNA多态性 有端粒结构;延伸：什么是顺反子;2.1.3 原核生物基因组;2.2 DNA的结构;2.2.1 DNA的一级??构;;多聚核苷酸链中新生磷酸糖苷键的产生;DNA的方向是5’-3’（蛋白质是N-C） DNA通常以线性或环状形式存在 DNA通常是双链的(dsDNA)，少数是单链的(ssDNA) DNA的一级结构是指4种核苷酸的排列顺序。;2.2.2 DNA的二级结构;B-DNA的反向平行双螺旋结构;大沟通常是蛋白质与DNA相互作用的部位……;DNA缠绕在组蛋白上……;右手螺旋：A-DNA, B-DNA 左手螺旋：Z-DNA;B构象：生物体内天然存在的DNA几乎都以B-DNA存在。 A构象：是在以钠、钾或铯作为反向离子时，将DNA纤维在75%相对湿度下进行X光衍射测定出来的。DNA-RNA杂交分子、RNA-RNA双链结构均为A构象。 Z构象：在DNA进行转录或其他一些生理过程中会产生Z-DNA结构，之后DNA会放出能量，形成B-DNA。;;扩展：其他结构;2.2.3 DNA的高级结构;L=T+W L (linking number)：环形DNA分子两条链间交叉的次数 T (twisting number)：盘绕数 W (writhing number)：超螺旋数 ;2.3 DNA的复制;2.3.1 DNA的半保留复制;2.3.2 复制的起点、方向和速度;从复制起点开始，双链解开形成叉子状的生长点，叫复制叉（replication fork）。;2.3.3 复制的几种主要方式;1 线性DNA双链的复制;延伸 端粒是染色体末端的DNA重复序列，作用是保持染色体的完整性。DNA每次复制端粒就缩短一点。一旦端粒消耗殆尽，染色体则易于突变而导致动脉硬化和某些癌症。 ;?;Poxvirus DNA replication;腺病毒通过蛋白引发的DNA复制;Schematic representation of the chromosome end decorated with members of the shelterin complex. (A) Linear (top) and folded T-loop (bottom) structural states of the telomere are depicted. Note th