第二章原核微生物形态、构造和功能1刘-.pptVIP

第二章 原核微生物形态、结构与功能 原核微生物主要类群 本章学习内容 第一节 细菌 一、一般形态（一）个体形态和排列 革兰氏染色法（Gram Stain） 异常形态 环境条件的变化： 物理、化学因子的刺激 培养时间过长 阻碍细胞正常发育 细胞衰老 营养缺乏 自身代谢产物积累过多 异常形态 正常形态 环境条件恢复正常 ▼细菌特殊形态 柄细菌、肾形菌、臂微菌、网格硫细菌、贝日阿托氏菌(丝状)、具有子实体的粘细菌、三角形、方形等是特殊形态的细菌。 一般细菌的大小范围： 0.5 ~ 1 μm （直径） 0.2~ 1 μm （宽） × 1~ 5 μm（长） 0.3~ 1 μm （宽） × 1~ 50 μm（长） (长度是菌体两端点之间的距离，而非实际长度) (二) 细菌大小1、范围 度量单位：微米(μm) 球菌：直径 杆菌：宽×长 螺菌：宽、长、螺距 细菌大小举例 0.5 - 1 0.8 - 1 0.5 × (1 - 3) (0.8 - 1.2)×( 1.2 - 3) (0.2 - 0.6)×(1 - 3) 乳链球菌 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 霍乱弧菌 直径或宽×长/ （ μm × μm ） 菌名 如：E.Coli长2 μm，宽0.5 μm 较大细菌，1997年在纳米比亚海岸沉积物中发现的硫细菌（Thiomargarita namibiensis）0.1～0.3mm，但有些可达0.75mm。肉眼可见。 较小细菌，1998年芬兰学者E.O.Kajander发现引起尿结石的纳米细菌（nanobacteria），直径仅50nm，为E.Coli的1/10，与病毒大小类似。分裂缓慢，三天才分裂一次，是目前所知最小的具有细胞壁的细菌。 ………………. 1500个相当一粒芝麻长 费氏刺尾鱼菌(0.08 mm x 0.6 mm即80 μm x600 μm ) (Epulopiscium fishelsoni)1985年发现） 显微镜测微尺 显微照相后根据放大倍数进行测算 目镜测微尺：测定 镜台测微尺：标定目镜测微尺 2. 测量方法 实验课学习掌握内容！ 个体差异； 干燥、固定后的菌体会一般由于脱水而比活菌体缩短1/3-1/4； 染色方法的影响，负染色法观察的菌体大于普通染色法,有时 大于活菌体(有荚膜的细菌)； 幼龄细菌一般比成熟的或老龄的细菌大(杆菌长度变化,宽度不变)； 环境条件，如培养基中渗透压增加会导致细胞变小。 3、细菌大小测量结果的影响因素 （三）细菌形态的观察  1、观察工具 普通光学显微镜 暗视野显微镜 相差显微镜 荧光显微镜 电子显微镜 普通显微镜结构示意图 光学显微镜制样 活体观察 染色 压滴法 悬滴法 菌丝埋片法 活菌 死菌 美蓝染色 简单染色 鉴别染色 革兰氏染色、鞭毛染色、芽孢染色与抗酸性染色等 2.显微样品制备之 光学显微镜制样 负染色 正染色 荚膜染色 特点：避免染色对细胞结构的破坏，用于运动性、摄食特性、生长繁殖过程中形态变化等观察 压滴法：菌悬液滴载玻片，加盖玻片直接观察 悬滴法：盖玻片滴一滴菌悬液，反转置于特制凹载玻片直接观察 菌丝埋片法：无菌小玻璃纸铺平板表面，涂布孢子悬液，培养后，取下玻璃纸置于载玻片，观察 光学显微镜样品制备－－活体观察 活体观察难看到微生物的细致形态和结构，需染色观察。 染色前需要对样品固定，目的：杀死细菌使菌体黏附在玻片上；还可增加对染料的亲和力。 常用：酒精火焰加热和化学固定两种方法 光学显微样品制备－－染色观察 染 料 ①碱性染料（basic dye）—带正电染料。其阳离子部分为发色基团，可与细胞中带负电的组分结合。如结晶紫、 番红、美兰、孔雀绿、碱性复红等。 ②酸性染料（Acid dye）—带负电染料。其阴离子部分为发色基团，可与细胞中带正电的组分结合。如伊红、 刚果红、酸性复红 等。 多数染料都是中性有机盐。据着色基的不同可分为以下类型： 负染色 涂片 干燥 固定 染色1min 水洗、吸干 镜检 简单染色 制备涂片标本→染色 丹麦医生C.Gram（革兰于1884年发明的一种）鉴别不同类型细菌的染色方法。 步骤： 结果: 阳性菌——紫色 阴性菌——红色 结晶紫初染 碘液媒染 乙醇脱色 番红复染 涂片固定 革兰氏染色法（Gram Stain） 革兰氏染色与CW 1、初染：碱性染料结晶紫初染 2、媒染：加碘液。提高染料和细胞间的相互作用 使二者结合得更牢固。 3、脱色：酒精或