10秋MMCB实验02细胞生理活动观察.pptVIP

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赵刚 分子细胞生物学课件-赵刚 MMCB实验二 细胞生理活动的观察 赵 刚 医学生物学教研室 2010秋季版 一、 实验目的 1. 熟悉细胞吞噬与细胞膜选择透性等细胞的生理活动。 2. 熟悉小鼠的腹腔注射与颈椎脱臼处死方法。 3. 进一步掌握临时制片技术与光镜的使用方法。 ? 二、实验原理(膜的选择透性) 红细胞置低渗液,胞内溶质浓度高于胞外,液体入胞,使膜胀破,溶血。 红细胞置入各种等渗溶液,膜对不同溶质的通透性不同,有的可透入,有的不能;即使能透入,速度也不同。 当溶质透入,胞内溶质浓度增加,水进入,细胞胀破,溶血。溶质透入速度不同,溶血时间不同。 红细胞在不同浓度溶液中 红细胞在不同浓度溶液中 膜简单扩散转运图解 帮助扩散图解 二、实验原理(细胞吞噬) 吞噬细胞(单核细胞、粒细胞); 巨噬细胞:非特异性吞噬外来细胞或异物; 巨噬细胞接触病原体时可伸出伪足包围进行内吞作用,进而消化分解。 实验前2天向小鼠腹腔注射6%淀粉肉汤, 以刺激小鼠产生较多的巨噬细胞。 细胞的吞噬作用示意图 三、实验内容 @小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的观察 (观察巨噬细胞的行为)。 @ 兔红细胞膜通透性的观察 (观察兔红细胞的溶血现象)。 小鼠巨噬细胞吞噬活动的观察 实验前2天小鼠腹腔注射蓝色淀粉肉汤; 2人一组,对一只小白鼠进行操作; 腹腔注射5%鸡红细胞悬液0.5ml,轻揉; 30min后,再腹腔注射生理盐水0.5ml; 颈椎脱臼法处死小鼠; 小心打开腹腔,吸取腹腔液,滴片,盖片; 光镜观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象。 含台盼蓝的小鼠 含台盼蓝的小鼠 含台盼蓝的小鼠 小白鼠的腹腔注射 颈椎脱臼法处死小鼠 兔红细胞膜通透性的观察 2人一组进行本实验内容的操作; 每组准备7只试管,编号0—6; 每管加入10%兔红细胞悬液0.4ml; 按《实验教程》p62的安排测试氯化钠、氯化铵、硝酸钠、乙醇、葡萄糖、甘油。 做好记录,分析结果。 巨噬细胞与鸡红细胞 鼠巨噬细胞、鼠红细胞、鸡红细胞 巨噬细胞中的蓝色吞噬颗粒 巨噬细胞吞噬鸡红细胞 小鼠巨噬细胞与鸡红细胞 巨噬细胞吞噬鸡红细胞 四、实验报告 1.写出实验原理、实验操作与实验结果。 2.绘图表示小鼠巨噬细胞的吞噬情况。 3.解答《实验教程》p63的2-3题。 THE END * *

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