exendin4对甲基乙二醛诱导的pc12细胞氧化应激的影响word格式论文.docxVIP

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exendin4对甲基乙二醛诱导的pc12细胞氧化应激的影响word格式论文

Exendin-4对甲基乙二醛诱导的PC12细胞氧化应激的影响摘要背景与目的:糖尿病相关性神经退行性疾病与氧化应激密切相关,高血糖导致甲基乙二醛大量蓄积。本课题拟探讨甲基乙二醛诱导PC12 细胞氧化应激的机制,并在此基础上加用胰高血糖素样肽-1(Glucagon-likepeptide-1,GLP-1)受体激动剂Exendin-4,研究其对甲基乙二醛诱导PC12 细胞氧化应激的影响及其机制。实验与方法:传代培养PC12 细胞,不同浓度甲基乙二醛(0~2.0mmol/l)处理PC12 细胞12h~48h,MTT 比色法检测细胞存活率;在此基础上加用Exendin-4 预处理细胞24h,0.75mmol/l甲基乙二醛干预24h,以N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理PC12 细胞24小时为阳性对照,MTT比色法检测细胞存活率,荧光酶标仪检测ROS 含量,黄嘌呤氧化酶法检测SOD活力。应用Exendin-4 100nmol/L或NAC10mmol/L预处理PC12 细胞24 小时,0.75mmol/L甲基乙二醛作用1 小时,Western Blot 检测蛋白P-I κB-α、IκB-α表达情况。结果:随着MG作用浓度的增加和作用时间的延长,PC12 细胞存活率逐渐降低;Exendin-4 预处理PC12细胞24h,在25~ 100nmol/LExendin-4 作用下,浓度依赖性地增加MG诱导的PC12 细胞的存活率,但是在200nmol/L Exendin-4 干预组,PC12 细胞的存活率并没有比100nmol/LExendin-4 干预组有进一步升高;以NAC预处理24小时为阳性对照,与MG单独处理组相比,Exendin-4 预处理组的ROS 表达量下降了65.30%(p0.01);NAC 预处理组ROS表达量下降了107.40%(p 0.01);Exendin-4 预处理组的SOD活力增加了5.30 U/mgpro(tp 0.01);NAC 预处理组的SOD活力增加了8.53 U/mgprot(p0.01)。Exendin-4 预处理组的P-IκB-α/IκB-α比例下降了25.50%(p 0.01);NAC 预处理组的P-IκB-α/IκB-α比例下降了35.14%(p 0.01)。结论:Exendin-4 浓度依赖性地增加甲基乙二醛诱导的PC12 细胞的存活率。Exendin-4能够减轻甲基乙二醛诱导的PC12细胞的氧化应激,其机制可能涉及抑制蛋白IκB-α的活化。关键词:PC12 细胞,甲基乙二醛,氧化应激,Exendin-4,NACEffectsof Exendin-4 upon Methylglyoxal-induced Oxidative Stressin PC12cellAbstractBackground and aims: Diabetes related neurodegenerativedisease is closelyrelated to oxidative stress. High blood glucosepromotes a largenumber accumulation of methylglyoxal.Thegoalofthis studywas to investigate themechanismofoxidative stress in PC12 cells induced bymethylglyoxal, and studywhetherExendin-4, aglucagon-like peptide-1 receptor agonist,could influenceoxidative stressinduced bymethylglyoxalin PC12 cells and its underlyingmechanisms.Materials and methods:CulturedPC12 cells wereinduced bymethylglyoxalat concentration rangingfrom 0 to 2.0mmol/lfor12-48 h. MTTassaywas used tomeasurethecell viability. On this basis, PC12 cells were exposed to 0.75mmol/l methylglyoxalfor24 h with pretreatment of Exendin-4 for24 h, and pretreatment of N-acetylcysteine for 24 has positive control,MTTassaywas used to measurethecell v

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