第二章蛋白质的生物合成.ppt

第二章蛋白质的生物合成Protein Biosynthesis 蛋白质的生物合成，即翻译，就是将核酸中由 4 种核苷酸序列编码的遗传信息，通过遗传密码破译的方式解读为蛋白质一级结构中20种氨基酸的排列顺序 。 翻译过程分为起始、延长、终止三个阶段。 翻译生成的多肽链，大部分需加工修饰成为有活性的蛋白质。 目录 第一节 蛋白质合成体系 第二节 蛋白质生物合成过程 第三节 蛋白质合成后加工和输送 第四节 蛋白质生物合成的干扰和抑制 第五节 重组DNA技术 蛋白质合成体系Protein Biosynthesis System 参与蛋白质生物合成的物质包括 20种氨基酸(AA)作为原料 酶及众多蛋白因子，如IF、eIF ATP、GTP、无机离子 一、翻译模板mRNA及遗传密码 mRNA是遗传信息的携带者 mRNA包括 5′–非翻译区（5′–UTR） 开放阅读框架区（ORF） 3′–非翻译区（3′–UTR） 开放阅读框架(ORF)—— 从mRNA 5?端起始密码子AUG到3?端终止密码子之间的核苷酸序列，各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链。 遗传密码表 1. 连续性(commaless) 2. 简并性(degeneracy) 遗传密码中，除色氨酸和甲硫氨酸仅有一个密码子外，其余氨基酸有2、3、4个或多至6个三联体为其编码。 同义密码的第一、第二两个核苷酸总是相同的，所不同的是第三个核苷酸 减少了由于碱基取代造成的有害突变 偏爱密码 2. 简并性(degeneracy) 3. 通用性(universal) 蛋白质生物合成的整套密码，从原核生物到人类都通用。 已发现少数例外，如动物细胞的线粒体、植物细胞的叶绿体。 密码的通用性进一步证明各种生物进化自同一祖先。 4. 摆动性(wobble) 转运氨基酸的tRNA的反密码需要通过碱基互补与mRNA上的遗传密码反向配对结合，但反密码与密码间不严格遵守常见的碱基配对规律，称为摆动配对。 摆动性说明一种tRNA为什么可以识别几种密码子，而几种密码子又代表一种氨基酸，还说明密码子与反密码子相互作用的摆动性与密码子的简并性有关。 密码子、反密码子配对的摆动现象 二、核蛋白体是多肽链合成的装置 每个细菌细胞中平均约有2000个核糖体，它们或以游离状态存在，或与mRNA结合成串珠状的多核糖体。 每个真核细胞内大约含106–107个核糖体，或与内质网结合形成粗糙内质网，或分布在细胞质中。 此外，线粒体和叶绿体内也有它们自己的核糖体。 核蛋白体的组成 （二）核糖体的功能 蛋白质生物合成的工厂 在蛋白质合成过程中，核糖体必须先与mRNA结合，并按5′→3′的方向沿mRNA移动，每次移动的距离相当于一个密码子。 核糖体上至少有两个与tRNA结合的不同位点： A位氨基酰位、P位肽酰位。 核糖体除具有肽酰转移酶活性外，还有起始因子、延伸因子和释放因子的结合位点。 三、tRNA与氨基酸的活化 tRNA 单链RNA 一般含有73 ~ 93个核苷酸 分子质量24 000 ~ 31 000 u 二级结构呈三叶草形，三级结构呈倒L形 tRNA有4个臂： 氨基酸臂 二氢尿嘧啶臀 反密码臂 TφC臂 tRNA的二级结构示意图 tRNA的三级结构示意图 tRNA的稀有碱基含量非常丰富，约有70余种 每个tRNA分子至少含有2个稀有碱基，最多有 19个，多数分布在非配对区 反密码子3′端邻近部位出现的频率最高，且 大多为嘌呤核苷酸，这对于维持反密码子环的稳定性及密码子、反密码子之间的配对是很重要的 tRNA与酶结合的模型 氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性。 氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性(proofreading activity) 。 氨基酰-tRNA的表示方法： Ala-tRNAAla Ser-tRNASer Met-tRNAMet 真核生物： Met-tRNAiMet 原核生物： fMet-tRNAifMet 蛋白质生物合成过程 The Process of Protein Biosynthesis 翻译的起始(initiation) 翻译的延长(elongation) 翻译的终止(termination ) 一、肽链合成起始 指mRNA和起始氨