现代生物技术2章.docxVIP

第二章 DNA重组技术 ---基因工程原理DNA重组技术也称基因克隆或者分子克隆，它实际上包括了一系列的实验技术，最终目的是把一个生物体中的遗传信息（DNA）转入另一个生物体。一个典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤（1）克隆重组： 提取供体生物的目的基因(或称外源基因), 酶 解连接到另一DNA分子上(克隆载体),形成一个新的重组DNA分子；（2）转化： 将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化；（3）筛选鉴定：对那些吸DNA的受体细胞进行筛选和鉴定；（4）培养表达对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检验 外源基因是否表达。1、DNA 结构与功能2.1.1 DNA分子组成：核苷酸（1）碱基：腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶（2）脱氧核糖（3）磷酸1.2 DNA 一级结构 是指4种核苷酸的连接及其排列顺序，表示了该DNA分子的化学构成。 DNA链上的脱氧核苷酸通过一个脱氧核苷酸的脱氧核糖3/-OH与相邻脱氧核苷酸5/-P形成 磷酸二酯键聚合而串联成为DNA链 。 Cargaff等科学家在20世纪50年代总结出DNA碱基组成的规律：A=T，G=C，A+C=G+T，A+G=T+C。这一规律提示了A与T，G与C配对的可能性，为Watson 和Crick提出了DNA双螺旋模型奠定了基础。1.3 DNA 二级结构 Watson 和Crick（195