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- 2018-05-18 发布于四川
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二 抗体酶 (abzyme) 1986年抗体酶研制成功 abzyme是具有某种酶活性的抗体,它通过制备抗体的方法制备。 1946年Pauling提出,酶催化化学反应速度的机理 1969年,Jencks首先设计了抗体酶的制备方法。 抗体酶的制备主要包括下列3个步骤: ① 分析某种化学反应的过渡态结构,合成稳定的过渡态类似物作为抗原或半抗原。 ② 免疫动物,产生抗体。 ③ 筛选抗体,分离出具有催化功能的抗体,即抗体酶。 对于这个设想有两个要解决的关键问题。 一是正确设计并合成化学反应过渡态的稳定的类似物。 二是对产生的抗体酶的选择。 1975年,发明了单克隆抗体技术,为抗体酶的制备奠定了方法学的基础。 1986年,Lerner等宣布研制成功了对羧酸酯水解具有催化活力的抗体酶。 同年,Schultz也宣布,获得了能水解对硝基苯氧基羧基胆碱的抗体。 已制备了能催化下列化学反应的抗体酶: ①酰基转移反应。 ②水解反应 ③重排反应 ④光诱导反应。 ⑤氧化还原反应。 ⑥金属螯合反应。 第三节 酶的分离纯化和活力测定 一是把酶制剂从很大体积浓缩到比较小的体积, 二是把酶制剂中大量的杂质蛋白和其他大分子物质分离出去。 判断分离提纯方法的优劣的指标: 总活力的回收:表示提纯过程中酶的损失情况。通过活力测定,检测酶在分离组分中出现的位置,比较每一步纯化的效率。 二、酶均一性判断 三、酶的
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