南京师范大学植物生理学试验课件.pptVIP

植 物 生 理 学 实 验 一、实验目的 本实验是植物生理学课堂教学中的一个重要环节，不仅与课堂讲授的基本理论、基础知识相结合，而且要使学生学会植物生理学的基本实验方法，并在科学态度、实验技能技巧、独立工作能力、理论联系实际能力等方面获得基本的训练。 二、基本要求 通过教学，要使学生学会植物生理学的基本实验方法、技术和设计思路，掌握植物生理学基本原理的验证方法和定量测定植物体内发生的生理生化变化，并初步具有完成综合性、设计性实验的能力。每次实验结束，学生均需写出一份实验报告。 Ⅰ质壁分离法测定组织渗透势 【方法与步骤】 配制各种浓度的蔗糖溶液→剥取洋葱鳞茎（或紫鸭趾草叶片）表皮→迅速投入各种浓度的蔗糖溶液中→低倍显微镜观察并记录质壁分离的相对程度→确定使细胞发生初始质壁分离的浓度→计算渗透势 【思考题】 1. 复习细胞渗透作用的原理 2.为什么选用有色素的洋葱鳞茎外表皮实验效果较好？ 3.影响测试结果的因素有哪些? Ⅱ冰点下降法 【实验原理】 根据物理化学溶液理论——拉乌尔冰点下降原理，溶液单位体积中所溶解的溶质颗粒总数相同，则引起冰点下降的数值相同。利用冰点渗透压计测定一定的冰点下降值对应的渗透浓度单位ic，代入公式计算。 【仪器与用品】 新鲜植物材料； 冰点渗透压计、液氮罐、注射器、纱布、吸水纸、Eppendorf管 【方法与步骤】 取材1-2克新鲜植物材料洗净包在锡箔纸中，放入液氮或低温冰箱中将细胞杀死→取出剪碎放入注射器溶冰，用加压法将胞液挤出，存于Eppendorf管待测→取20微升待测液于冰点渗透压计的测定管测定→提出探头，擦拭后可继续下一个样品的测定。 【思考题】 冰点下降法与质壁分离法的原理有何不同？  【实验原理】 把等量的植物组织放入一系列具浓度梯度的蔗糖溶液中，利用小液流法寻找植物组织放入后浓度不变的蔗糖溶液，计算出此蔗糖溶液的渗透势即等于所测植物的水势。 【仪器与用品】 菠菜 试管 毛细滴管 移液器 剪刀 镊子 蔗糖 甲烯蓝 【方法与步骤】 配制一系列蔗糖溶液→各放入等量植物组织→加入次甲基蓝粉，染色→毛细管移取蓝色小液滴，放入未染色同浓度的蔗糖溶液中→找出液滴不动的蔗糖溶液→计算蔗糖溶液的渗透势＝所测植物组织的水势。 【思考题】 用小液流法测定植物组织水势与用质壁分离法测定植物细胞渗透势都是以外界溶液的浓度算出的溶质势为根据，它们之间的区别何在？ 【实验原理】 有些有机溶剂涂在叶片表面，失水很快形成一层薄膜，上面就印在叶片表面的保卫细胞与气孔的轮廓。在显微镜下可观察到，结合显微测微尺可测其开张度大小。 【仪器与用品】 植物叶片 显微镜 显微测微尺 载玻片 盖玻片 牛皮胶(或火棉胶) 【方法与步骤】 配制牛皮胶溶液→在叶的下表皮涂胶→成膜后取一小片→镜检→测量 【思考题】 测量不同生境下、不同植物叶片的气孔开张度，比较后说明原因。 400倍下的沙青叶片气孔（2009-10-14日8-9点） 【实验原理】 利用Ba(OH)2溶液吸收呼吸释入的二氧化碳,实验结束后,用草酸滴定残余的 Ba(OH)2，从空白和样品两者消耗草酸溶液之差，即可计算出呼吸过程释放的二氧化碳的量。 【仪器与用品】 广口瓶 温度计 酸式滴定管 干燥管 尼龙网制小篮 Ba(OH)2麝香草酚酞 5%乙醇 草酸(重结晶) 小麦种子 仪器与用品 1、实验仪器 恒温箱，天平，培养皿，烧杯， 镊子，漏斗，滤纸，琼脂 2、实验试剂 0.1%BTB溶液，1%BTB琼脂凝胶 3、实验材料 种子 方法与步骤 1、浸种 同TTC法 2、显色 取吸胀种子200粒，埋于备好的琼脂凝 胶培养皿中（间隔至少1cm）。置于30-35℃ 下培养2-4h，观察种胚周围的颜色。用沸水 杀死的种子作对照。 3、算活种子的百分率。 Ⅲ 红墨水染色法 实验原理 凡生活细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的能力，而死的种胚细胞原生质膜丧失这种能力，于是染料便能进入死细胞而染色。 仪器与用品 1、实验仪器 恒温箱，烧杯，培养皿，漏斗，镊子 2、实验试剂 5%红墨水 3、实验材料 种子 方法与步骤 1、浸种 同上述TTC法 2、染色 吸胀种子200粒→纵切为二→一半加 5%红墨水，染色10-15min→倒去红墨水→ 用水冲洗 →检查种子死活。 用沸水杀死的种子作对照。 3、计算活种子的百分率。 思考题 1、试验结果与实际情况是否相符？为什么？ 2、就你所知还有哪些快速方法可以测定种子 的生活力？ 3、试比较TTC法、BTB法、红墨水，测定的结 果是否相同，为什么？ 实验13 高温和低温对植物的伤害 【实验原理】 植物在遭遇不良环境（如高温、低温等