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膨化炮制对何首乌中蒽醌含量的影响 　　【摘要】[目的]运用醋酸镁比色法对膨化炮制前后的何首乌中的蒽醌成分进行含量测定。考察膨化炮制对何首乌中蒽醌含量的影响。[方法]膨化炮制前后的何首乌分别经直接超声处理、酸水解后超声处理，以1，8―二羟基蒽醌为考察指标，分别测定膨化前后游离蒽醌、结合蒽醌含量。[结果]膨化后何首乌中游离蒽醌和结合蒽醌都有所下降，但结合蒽醌要比游离下降更明显。[结论]以何首乌中蒽醌含量作参考，挤压膨化适合何首乌炮制加工。 　　【关键词】醋酸镁比色法 膨化炮制 结合蒽琨 游离蒽醌 　　 　　何首乌具有补肝肾、益精血、乌须发、强筋骨之功效，在抗衰老、增强机体免疫、抗菌、造血和改善心血管功能等方面有许多独到之处，是滋补肝肾的常用中药，但几种现行的何首乌炮制工艺，如清蒸法、黑豆炮制法、姜制法和酒制法等具有耗时长，操作繁琐，而且连续化操作性差的缺点。所以我们把食品加工中的挤压膨化技术应用于何首乌的炮制加工，这种炮制方法加工方便，口感好。但是膨化加工后何首乌中主要成分含量如何变化，将影响到我们这个技术的可行性。因此我们进行下面的实验对膨化前后何首乌中蒽醌含量进行测定。 　　1．实验仪器和材料。TU―1901紫外分光光度计，FA1004型精密电子天平，SK8200LH超声仪，DGG－9246A恒温干燥箱、1，8―二羟基蒽醌对照品（中国药品生物制品检定所，批号0829－9702）、何首乌饮片（购买自峨眉仙山中药厂）。 　　2．蒽醌含量测定。 　　2．1 对照品溶液的制备。取经105℃干燥至恒重的1，8―二羟基蒽醌对照品适量，精密称定0.5mg置25mL的容量瓶中，用甲醇溶解并定容，作为对照品溶液。 　　2．2 供试品溶液的制备。分别称取何首乌饮片粉末、膨化后何首乌（过80目筛）各0.5g，分别置于具塞锥形瓶中，加入25mL甲醇，称重。超声处理30min，放冷，再次称重，用氯仿补足重量。过滤，残留物用甲醇5mL，洗涤2次，合并滤液。将滤液蒸干，加入10mL水使溶解，分别用氯仿10mL萃取3次，合并氯仿萃取液，水层留下备下面试验用[1]。用蒸馏水洗涤氯仿液数次至水层为中性为止[2]，吸弃蒸馏水，氯仿液置于50mL容量瓶中，加氯??定容至刻度，作为供试品溶液（1）、（1）′，用来测定膨化前后何首乌中游离蒽醌含量。 　　上面备用水层加0.5mL浓硫酸和氯仿10mL，在70～80水浴加热回流水解2h，放冷，水解液置分液漏斗中，取氯仿层，水层再分别用10mL萃取3次，合并氯仿液，用蒸馏水洗涤氯仿液数次至水层为中性为止[2]，吸弃蒸馏水，氯仿液置于50mL容量瓶中定容至刻度，作为供试品溶液（2）、（2）′，用来测定膨化前后何首乌中结合蒽琨含量。 　　2．3 波长的选择。何首乌羟基蒽琨类结构含有1，8―二羟基蒽醌母环，它们与醋酸镁均显紫红色，把显色后的对照品和供试品置于400～600nm波长处扫描，可以看到在波长510nm处有最大吸收，因此选择510nm作为测定波长。 　　2．4 标准曲线的绘制。精密吸取2.1项下的对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL置10mL容量瓶中，于水浴上蒸干，放冷，将残渣用0.035mol/L的醋酸镁―甲醇溶液溶解并定容，以0.035moL/L醋酸镁―甲醇溶液为空白对照品，在510nm波长处测定吸光度，以吸光度（Y）为纵坐标，浓度（X，ug/mL）为横坐标，绘制标准曲线，求得回归方程为：Y＝0.0004X－0.0028（r2＝0.9999）。结果表明：1，8―二羟基蒽醌在400～2400ug范围内浓度与吸光度呈良好的线性关系。 　　2．5 精密度试验。精密吸取2.1项下的对照品溶液0.5mL，按醋酸镁比色法测定5次，测得吸光度的相对标准偏差（RSD）为0.63%。 　　2．6 回收率试验。称取已知含量的样品5份，每份0.5g，置50mL容量瓶中，加入1mL对照品溶液，再加入甲醇25mL，称重。超声处理30min，放冷，再次称重，用氯仿补足重量。过滤，残留物用甲醇5mL，洗涤2次，合并滤液。将滤液蒸干，加入10mL水使溶解，分别用氯仿10mL萃取3次，合并氯仿萃取液，用蒸馏水洗涤氯仿液数次至水层为中性为止，吸弃蒸馏水，氯仿液定容于50mL容量瓶中，从容量瓶中取4mL氯仿液，置于10mL容量瓶中，水浴蒸干，将残渣用醋酸镁－甲醇定容至刻度。计算1，8―二羟基蒽醌的回收率。结果表明，平均回收率RSD=2.42%。 　　2．7 含量测定。精密吸取“2.3”项下的供试品溶液（1） 8mL，置l0mL容量瓶中，水浴蒸干，放冷，将残渣用0.035mol/L醋酸镁-甲醇溶液溶解并定容。以醋酸镁―甲醇溶液为空白对照品，在510nm波长处测定吸光度，计算游离蒽醌的含量，详见下表。