第六章芳酸类非甾体抗炎药物分析.pptVIP

二、HPLC法测定人血浆中布洛芬含量 色谱条件：色谱柱为Shim-packCLC-ODS(150mm×6mm, 10μm) 预柱为YWG-C18；流动相为甲醇-20mol/L磷酸二氢 钾冲溶液(70:30, pH=4.0); 流速为1.0ml/min; 检测波长为221nm；内标物为肉桂酸。 样品预处理：取肝素抗凝血浆0。24ml+内标液+甲醇0.5ml,振荡 混匀，离心(1000r/min)15min,取上清液10 μl直 接进样分析。布洛芬和肉桂酸tR为5.15和2.85min。 回归方程：以对照品与内标的峰高比对浓度回归，其回归方程为： Y = 4.05 ×10-2C – 2.0 ×10-3, r = 0.9999。 回收率测定：空白血浆 + 布洛芬对照品高、中、低三种浓度， 按样品处理项下测定，测得平均回收率为99.2 ±1.6%。 精密度：日内精密度为RSD＝1.8%；日间精密度为2.8%。 1.0，1.5，2.0，3.0，4.0，6.0，8.0，10.0，12.0h自肘静脉 取血1.5ml，肝素抗凝，按“样品处理方法”项下操作，求算血 药浓度，结果见P137表6－1。 试验结果： 1.血浆用甲醇除蛋白后，直接进样，经预柱净化，再进分析柱 回收率高，分析速度快(6min完成)，分离效果好。 2.口服一次后Tmax = 30min～90min；体内维持4h～6h。与文 献报道的结果一致。 3.本法可用于临床治疗药物浓度检测和药代动力学研究。 人血浆样品测定：受试者8人；给药剂量600mg，给药后0.5，0.75 Tianjin Medical University 天津医科大学药学院《药物分析》第六章—— 谢谢！ 二氟尼柳胶囊的鉴别： 以GF254为固定相，正己烷-二氧六环-冰醋酸（85:10:5）为展开剂，254nm检视。 美洛昔康制剂： 以三氯甲烷-甲醇-二乙胺（60:5:7.5）为展开剂。 七、薄层色谱法 八、HPLC法 离子对色谱法（paired ion chromatography，PIC） RPIC是把离子对试剂加至极性流动相中，被分析的样品离子在流动相中与离子对试剂生成不荷电的中性离子对，从而增加了样品离子在非极性固定相中的溶解度，使分配系数增加，改善分离效果。 分配系数与离子对试剂的碳链长度及被分离组分的极性有关。分配系数越大，保留时间越长。 流动相 固定相 B+H BH+ + RSO3Na RSO3- + Na+ (PICB) 中性离子对 [BH+.RSO3-] [BH+.RSO3-] 常用离子对试剂 通常所选用离子对试剂的电荷应与被分离样品的电荷相反。 PICB：用于分离碱类或带正电荷的物质，常用带负电荷的烷基磺酸钠，如庚烷磺酸钠（PICB7）。 PICA：用于分离酸类或带负电荷的物质，常用带正电荷的季铵盐，如四丁基氢氧化铵、十六烷基三甲基溴化铵。 离子抑制色谱（ion suppression chromatography，ISC） 在反相色谱中，通过调节流动相的PH或利用同离子效应，抑制样品组分的解离，增加它在固定相中的溶解度，以达到分离有机弱酸、弱碱的目的的技术。 适用于3.0-7.0的弱酸及7.0-8.0的弱碱，对于小于3.0的酸及大于8.0的碱，应采用离子对色谱或离子交换色谱。 常用抑制剂：弱酸（乙酸）、弱碱（氨水）、缓冲盐（磷酸盐、乙酸盐） PIC与ISC区别 分离机制不同 ISC使组分保持分子状态，抑制离子是组分自身离子；PIC是形成不荷电离子对，抑制离子是外来的。 分离对象范围不同 ISC适用有机弱酸、弱碱、两性化合物； PIC适用更广泛些。 ISC简便，比PIC经济，但重复性较差。 第三节 特殊杂质检查 阿司匹林及水杨酯合成路线 一、ASA中特殊杂质的检查 1. 游离水杨酸检查 利用SA可与FeCl3呈色，用比色法检查。 Chp2010采用1%冰醋酸甲醇溶液制备供试品，防止阿司匹林水解，采用HPLC法，ODS反相色谱柱，以乙腈-四氢呋喃-冰醋酸