正确评价和选择酶制剂.PDF

正确评估和选择酶制剂 现在酶制剂已广泛应用于各种畜禽及水产饲料中，但目前市场上酶制剂生产厂家及种类 繁多，标准不一，产品良莠不齐，给使用者带来了诸多不便。怎样比较不同厂家的酶制剂、 怎样选择优良适用的酶制剂，成为困惑选购者的问题。本文就影响酶活力的因素、如何评价 酶制剂的质量问题进行讨论，供选用者参考。 1 酶的特点 1． 1 高效催化性 以发生反应的分子数表示，酶催化反应速度比非催化反应高 108 20 ~10 倍；比化学催化剂 的催化速度高 107 13 ~10 倍。酶的高效催化性决定了酶能在动物体内新陈代谢中发挥有力的催 化作用，如果没有酶的作用，动物体内的各种生化反应都将无法进行，生命无法延续。 1． 2 高度专一性 一种酶只作用于某一种或某一类特定的底物。例如：蛋白酶只对蛋白质水解起作用。酶 的专一性要求酶制剂的选择要根据需要有的放矢，不能盲目使用。 1． 3 失活变性作用 蛋白质易于失活变性使酶具有不稳定性，凡能使蛋白质变性的因素都能破坏酶，使之丧 失活性，如强酸、强碱、高温等。 1．4 可调控性 酶活力的调控方式多种多样，如抑制作用、诱导作用、酶原激活、共价修饰、激素调控 等。这一性质对我们有两方面的意义：1）在特定条件下，动物的内源消化酶会缺乏，如应 激状态（断奶、逆境）、疾病发生、动物幼年或老年时期等，需要外源酶调控；2）酶制剂 生产中，在一定工艺条件下可诱导产生大量高活性的酶。 2 酶活力的测定 消化酶 酶促反应可表示为：底物+H20 消化酶 水解产物 酶活力常用单位时间内、单位体积中底物的减少量或产物的增加量来表示。实际测定中以测 定产物的增加量为好 （因底物过量，变化量小不易测准，而产物从无到有可正确测定）。根 据底物或产物的性质，可采用的方法有滴定法、比色法、电化学法、荧光法、同位素法等。 2． 1 测定方法 2．1．1 同种酶测定底物和产物的方法不同。例如：淀粉+水 淀粉酶 可溶性还原糖。 测定底物的原理是：淀粉与I2液显蓝色，用蓝色消失的时间或速度来表示酶活力。 测定产物的原理是：还原糖与 3，5-二硝基水杨酸反应产生棕红色物质，在 540nm 比色测定 溶液显色深浅来测定酶活力。 2．1．2 同种底物或产物可用不同方法测定。例如：木聚糖+水 木聚糖酶 木糖等还原糖。产 物还原糖可用 3，5-二硝基水杨酸法、砷钼酸盐法、铁氰化钾法等测定，不同方法测定的结 果可能不相同。 2．2 测定条件 2．2．1 温度 不同酶有不同变性及催化反应的最适温度。同一酶样在不同温度下测定值有很大差异， 见表 1。 表 1 同种酶制剂在不同温度下测定的酶活力 温度 酸性蛋白酶 木聚糖酶 纤维素酶 35℃ 48706 4851 877 40℃ 49112 4904 936 45℃ 49910 4967 939 50℃ 50138 5089 1027 55℃ 50021 5203 962 60℃ 49070 4955 893 2．2．2PH 值 不同酶的最适 pH 值不同，同种酶制剂在不同 pH下测定的酶活力见表 2。 表 2 同种酶制剂在不同 pH 下测定的酶活力