久效磷农药对马粪海胆hemicentrotus pulcherrimus多巴胺能神经系统发育的影响-effects of monocrotophos pesticide on dopaminergic nervous system development of strongylocentrotus pulcherrimus.docxVIP

万方数据 久效磷农药对马粪海胆(Hemicentrotus pulcherrimus)多巴胺 能神经系统发育的影响 摘 要 早期发育阶段的海胆是研究有机磷农药神经毒性作用的理想模式生物。海胆 多巴胺(DA)能神经系统发育较胆碱能系统早，也比 5-羟色胺能系统更早调控海 胆早期形态发生和游泳行为。有机磷农药对早期海胆形态发生和游泳行为均有一 定的抑制作用，而且对胆碱能系统和 5-羟色胺(5-HT)能系统发育均有一定的扰乱 作用，但其对 DA 能系统发育的影响及其功能调控后果尚不明确。DA 递质及多 巴胺受体(DR)是 DA 能系统发育的重要基础，并可协同其他系统调控海胆早期形 态发生。DA 及其受体合成后 DA 能神经元发育进入 DA 能神经元前体细胞期， 该时期 DA 及 1 型 DR (DRD1)均以颗粒形式表达、结合(DA/DRD1-Gs)并与纤毛 基体相连，是系统调控海胆胚胎和幼虫游泳行为的重要形态学基础。DA 递质含 量变化是其各代谢过程综合调控的结果，而???生理状态下，DR 受 DA 含量变化 反馈性调节。因此，有机磷农药对 DA 能系统发育的影响可能与 DA 和 DRD1 以 及 DA 代谢过程重要代谢酶或转运体有关。本研究选取马粪海胆(H. pulcherrimus) 早期发育阶段关键时期(12-hpf 囊胚早期、15-hpf 浮游囊胚期、18-hpf 原肠胚早期、 24-hpf 原肠胚晚期、30-hpf 棱柱幼虫早期、36-hpf 棱柱幼虫期和 48-hpf 二腕幼虫 早期)进行实验，用 0.01、0.10 和 1.00 mg/L 久效磷农药进行暴露并设对照，探究 了久效磷农药对 DA 含量和 DRD1 mRNA 表达以及 DA 代谢重要因子的影响，进 而分析了其对 DA 能系统发育的影响及机制。 本文研究结果主要有： (1) 生理状态下，马粪海胆(H. pulcherrimus)早期发育阶段 DA 含量和 DRD1 mRNA 表达均无显著性变化，TH mRNA 表达水平和 DAT 含量稳定是其重要原 因。另外，MAO 活力和 MAO-A mRNA 表达变化呈一定规律。久效磷农药对马 粪海胆(H. pulcherrimus)早期发育阶段 DA 含量及其代谢酶和转运体(TH 和 MAO-A mRNA 表达、DAT 含量及 MAO 活力)、DRD1 mRNA 表达均有不同程度 扰乱作用。 (2) 久效磷农药能够在囊胚早期(12-hpf)、原肠胚早期(18-hpf)和棱柱幼虫期 (36-hpf)通过影响 TH mRNA 表达和 DAT 含量进而上/下调 DA 含量，造成 DA 能 I 系统发育及其功能调控异常。二腕幼虫早期(48-hpf)，久效磷农药还能通过上调 DAT 含量抑制 DRD1 mRNA 表达。其他各时期(15、24 和 30-hpf)，虽然久效磷农 药对 DA 含量和 DRD1 mRNA 表达均无影响，但却可以造成 TH mRNA 表达、DAT 含量、MAO 活力或 MAO-A mRNA 表达紊乱。 综上可知，久效磷农药能够通过扰乱马粪海胆(H. pulcherrimus)早期发育阶 段 TH mRNA 表达和 DAT 含量造成 DA 代谢异常，进而上/下调 DA 含量、抑制 DRD1 mRNA 表达，造成 DA 能系统发育及其功能调控异常。 关键词：久效磷农药，海胆，早期发育阶段，多巴胺能神经系统，神经发育毒性 II The Effect of Monocrotophos Pesticide on Dopaminergic Nervous System development in Sea Urchin (Hemicentrotus pulcherrimus) Abstract Sea urchin embryo and larvae in the early developmental stages is an ideal model for the research about developmental neurotoxicity. Dopaminergic nervous system is more sensitive to neurotoxic effects than cholinergic system, and also can regulate the morphogenesis and swimming behaviors of sea urchin embryo and larvae earlier than serotonergic system. Organophosphate pesticides can interfere with the dopam