Fhit在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义.docVIP

Fhit在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义 【摘要】目的探讨脆性组氨酸三联体基因蛋白Fhit在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义。方法免疫组化SP法检测12例正常子宫内膜，32例子宫内膜增殖症，42例子宫内膜癌组织中Fhit蛋白表达情况。结果Fhit蛋白在子宫内膜癌组织中存在表达下降现象，其表达下降率为40.5%，在正常子宫内膜及子宫内膜增殖症中Fhit蛋白均为阳性表达，癌组织与其相比，差异具有统计学意义（P0.05）。癌组织中，Fhit蛋白表达下降与组织学病理分级、手术临床分期、肌层浸润和淋巴结转移有关（P0.05），而与患者的年龄、月经状况、组织学类型等无关（P＞0.05）。结论Fhit蛋白表达下降与子宫内膜癌的发生、发展关系密切，可作为判断子宫内膜癌恶性程度的指标。 【关键词】 子宫内膜腺癌 脆性组氨酸三联体 免疫组织化学 肿瘤的发生、发展是多因素综合作用的结果，其中涉及癌基因的激活、抑癌基因的失活、肿瘤细胞凋亡受抑等。抑癌基因的失活是目前肿瘤研究的热点。脆性组氨酸三联体基因（Fragile hitidine triad,Fhit） 是Ohta等［1］用外显子捕获法克隆出来的定位于人类3号染色体短臂3P14.2区的一候选抑癌基因。研究表明Fhit基因存在于人类所有正常组织，而在许多肿瘤组织中则存在Fhit基因的失活［2］及Fhit蛋白的异常表达。本实验通过免疫组织化学的方法，从蛋白水平检测子宫内膜癌组织中Fhit蛋白表达情况，并对其与临床病理参数间的关系进行分析，探讨Fhit基因与子宫内膜癌发生、发展的关系。 1 材料与方法 1.1 材料 收集兰州医学院第一附属医院病理科、甘肃省肿瘤医院病理科、兰州市妇幼保健院病理科2001年1月～2003年11月手术切除，经病理确诊的子宫内膜癌存档蜡块组织42例，同期因子宫脱垂行子宫切除术的正常子宫内膜12例，经宫腔镜活检确诊的子宫内膜增殖症32例。所有病例术前均未接受放疗、化疗或激素治疗。患者平均年龄51岁。子宫内膜癌组织依照FIGO（1988）标准进行分级、分期。其中组织学病理分级G1 18例，G2 13例，G3 11例；手术临床分期:Ⅰ期19例，Ⅱ期15例，Ⅲ期8例；无肌层浸润8例，浅肌层浸润23例，深肌层浸润11例；无淋巴结转移28例，有淋巴结转移14例。 1.2 试剂与方法 免疫组化SP法。兔抗人Fhit多克隆抗体（即用型）购自北京中山生物技术公司，SP广谱超敏试剂盒、PBS缓冲液、DAB酶底物显色剂等均购自福州迈新生物技术公司。石蜡组织切片常规脱蜡、水化，其余操作按SP试剂盒说明书进行。 1.3 结果判定 Fhit蛋白主要定位于细胞浆，以抗体在胞浆内出现黄色颗粒为阳性信号。参照文献［3］，对细胞染色强度及阳性细胞百分比进行评分。先按染色强度打分：0分为无色，1分为浅黄色，2分为棕黄色，3分为棕褐色，染色强度需与着色背景相对比；再按阳性细胞所占百分比打分：无阳性细胞为0分，1分为阳性细胞le;10%，2分为阳性细胞11%～50%，3分为阳性细胞51%～75%，4分为阳性细胞＞75%；染色强度与阳性细胞百分比的乘积ge;2分为免疫反应阳性，＜2分为表达减低或表达缺失（称为表达下降或免疫反应阴性）。 1.4 统计学处理 SPSS8.0软件系统，采用chi;2检验。 2 结果 2.1 Fhit蛋白在不同子宫内膜组织中的表达 12例正常子宫内膜和32例子宫内膜增殖症组织中，Fhit蛋白均为阳性表达，见图1～3。42例子宫内膜癌组织中，Fhit蛋白阳性表达25例（59.5%）见图4，表达下降者17例，见图5，表达下降率40.5%。与正常子宫内膜和子宫内膜增殖症组相比，差异具有统计学意义（chi;2值分别为4.315、16.815；P值分别为0.011、0.000）。 2.2 子宫内膜癌组织中Fhit蛋白表达与不同临床病理参数的关系 本实验发现子宫内膜癌组织中，Fhit蛋白表达与临床病理参数相关（P＜0.05），而与患者年龄、有无绝经及组织学类型无关（P＞0.05）。 随组织学病理分级的增加、手术临床分期进展及肌层浸润程度的加深、有淋巴结转移Fhit蛋白表达降低。其中除G2与G3、Ⅱ期与Ⅲ期、浸润浅肌层组与浸润深肌层组差异无统计学意义（P＞0.05）外，其余各组差异均具有统计学意义（P＜0.05），见表1。 3 讨论 Fhit基因定位于人类3号染色体短臂3P14.2区，是组氨酸三联体（Histidine Triad，HIT）基因家族成员，由Ohta等［1］于1996年用外显子捕获法定位并克隆出来，是一候选的抑癌基因。Fhit基因由10个外显子组成，59为编码区，编码由147个氨基酸组成的分子量为16.8KD的脆性组氨酸三联体蛋白。Fhit蛋白结构类似于二