Wilson病基因产物在人肝细胞内存在和定位的研究.docVIP

Wilson病基因产物在人肝细胞内存在和定位的研究 中国神经精神疾病杂志 2000年第4期第26卷 论著与学术交流 作者：侯国庆　梁秀龄　陈嵘　黄帆　徐评议　欧翠华　王莹　唐莉雯 单位：侯国庆　梁秀龄　陈嵘　黄帆　徐评议　欧翠华　王莹（中山医科大学附属第一医院神经科510080）；唐莉雯（Department of Pharmacology, University of Kentucky, KY 40506） 关键词：肝豆状核变性；P型ATP酶；铜；肝细胞 　　【摘要】　目的　证实Wilson病铜转运P型ATP酶(WD蛋白)在人肝内的存在，并初步研究其在肝细胞内的具体定位。方法　应用Western-blot蛋白印迹技术对离体培养正常人肝细胞内蛋白进行分离；通过高浓度铜及P型ATP酶阻滞剂矾酸钠、激动剂长春新碱孵育培养，差速离心分离肝细胞胞浆、溶酶体、线粒体和微粒体，对各亚细胞铜含量分别对照分析。结果　人肝细胞内分离出155 kDa的WD蛋白特异性条带；在人肝细胞质膜、微粒体内存在有铜转运P型ATP酶，其阻滞剂及激动剂对肝细胞铜转运有显著影响。结论　证实正常人肝细胞存在WD蛋白，其存在部分可能在肝细胞质膜、内质网和高尔基器。 A preliminary study of presence and localization of the Wilson disease gene pro