第42讲 血红蛋白的提取和分离.docVIP

第42讲　血红蛋白的提取和分离 (时间:40分钟　分值:90分) 测控导航表 知识点 题号及难易度 1.凝胶色谱、凝胶电泳 3(中) 2.缓冲溶液 5 3.蛋白质分离实验操作 1(中),2,4,6,7 一、选择题:本大题共5小题,每小题8分,共40分。 1.(2011·广东理综)以下关于猪血红蛋白提纯的描述,不正确的 是(　D　) A.洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂 B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少 C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测 D.在凝胶色谱法分离过程中,血红蛋白比相对分子质量较小的杂蛋白移动慢 解析:生理盐水为猪体细胞的等渗溶液,所以在洗涤红细胞时,使用生理盐水可维持细胞的正常形态,A项正确;由于哺乳动物的成熟红细胞缺少细胞核和各种细胞器,所以提纯时杂蛋白相对较少,B项正确;如果凝胶色谱柱装填得很成功,分离操作也正确,能清楚地看到血红蛋白的红色区带均匀、狭窄、平整,随着洗脱液缓慢流出,所以血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测,C项正确;当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢,后洗脱出来,D项错误。 2.(2014南通一模)下列有关“血红蛋白提取和分离”的相关叙述中,正确的是(　D　) A.用蒸馏水进行红细胞的洗涤,其目的是去除细胞表面杂蛋白 B.将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较大的杂质 C.血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂 D.整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持血红蛋白的结构 解析:红细胞的洗涤用的是生理盐水,其目的是去除血浆蛋白等杂质,有利于后续步骤的分离纯化;而本实验中蒸馏水的作用是涨破红细胞,使血红蛋白释放。将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较小的杂质。血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是溶解细胞膜;整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了保持pH相对稳定,以维持血红蛋白的结构。3.(2013泸州质检)已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子,其分子大小、电荷的性质和数量情况如图所示,下列有关蛋白质分离的叙述正确的是(　C　) A.若将样品以2 000 r/min的速度离心10 min,分子戊存在于沉淀中,则分子甲也存在于沉淀中 B.若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质,则分子甲移动速度最快 C.将样品装入透析袋中透析12 h,若分子乙保留在袋内,则分子丙也保留在袋内 D.若用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子,则分子甲和分子戊形成的电泳带相距最远 解析:从图中可知相对分子质量的大小依次为:丙丁乙戊甲;电荷量在0的左边为负电荷,从右至左电荷数依次增多,在右边为正电荷,从左至右电荷数依次增加。SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子主要是根据相对分子质量大小的不同。 4.下列有关提取和分离血红蛋白的叙述中,不正确的是(　B　) A.样品的处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液 B.通过透析可以去除样品中相对分子质量较大的杂质 C.可以通过凝胶色谱法将相对分子质量较大的杂蛋白除去,即样品的纯化 D.可以通过SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度 解析:用透析法可除去样品中相对分子质量较小的杂质。 5.在血红蛋白的整个提取过程中,不断用磷酸缓冲液处理的目的 是(　D　) A.防止血红蛋白被氧气氧化 B.血红蛋白是一种碱性物质,需要用酸中和 C.磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程 D.让血红蛋白处在稳定的pH范围内,维持其结构和功能 解析:在血红蛋白的整个提取过程中,必须保持体外的pH与体内的基本一致,因此要不断用磷酸缓冲液处理。二、非选择题:本大题共2小题,共50分。 6.(2013四川成都外国语学校模拟)(25分)下图甲、乙表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置,请回答下列问题: (1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有　　　　　　　功能。? (2)甲装置中,B是血红蛋白溶液,则A是　　　　　　;乙装置中,C溶液的作用是　 。 (3)甲装置用于　　　　　　,目的是　? 　　　　　　　　　　　　。用乙装置分离蛋白质的方法叫　　　 　　　　　,是根据　　　　　　　　　　　分离蛋白质的有效 方法。? (4)用乙装置分离血红蛋白时,待　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　时,用试管收集流出液,每5 mL收集一管,连续收集。 ? (5)血红蛋白提取和分离的过程可分为四步:样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。其中样品处理包括