生化试验教材实验二：血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳.pptVIP

实验二 血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳 刘向华 南京医科大学 生化与分子生物学系 Nanjing medical university Department of biochemistry and molecular biology 一、目的与要求： 了解电泳的原理、练习醋酸纤维素薄膜电泳技术。 蛋白质的两性电离及等电点 **蛋白质的等电点（pI） pI PH pI Pro PH pI Pro + - 二、原理： refers to the phenomenon that a molecule with a net charge will move in an electric field. Electrophoresis 电泳技术 带电荷多、分子量相对小的泳动速度快；带电荷少、分子量相对大的泳动速度慢。 血清蛋白：清蛋白、α1、α2、β、γ球蛋白 cellulose acetate membrane 以醋酸纤维素薄膜（CAM）作为电泳支持体 三、操作步骤： 1、装置电泳箱。 2、点样：浸于巴比妥溶液中的薄膜，滤纸轻轻吸干----半干燥态。铅笔标记；点样器沾适量新鲜血清，垂直点样。 3、放入电泳槽。保持膜直；不下垂。 4、通电：150伏，1小时。断电后，取膜。 5、染色：氨基黑染色5 min。 6、浸洗：漂洗液浸洗3次，每次5 min。 区分电泳箱正负极 快 安全