第11章 节 rna生物合成.ppt

第十一章RNA的生物合成;Department of Genetics and Molecular Biology ;生物合成RNA的两种方式;转录概述;两个方面;第一节 转录（Transcription）;一 转录模板;模板链（template strand） 反意义链，指导RNA合成的DNA链 编码链（coding strand） 有意义链，不被转录的DNA单链 其碱基序列除有T无U外，与转录产物RNA相同。;二 RNA聚合酶;（一）原核生物RNA聚合酶;2.功能 α亚基决定转录基因的类型和种类； β亚基催化与模板链配对结合的相邻 NTP 以 3, 5 - 磷酸二酯键聚合； β 亚基促进酶与模板 链结合，并使DNA双 链打开17bp；;σ亚基辨认转录起始位点，并与核心酶结合成全酶启动转录。 不同的σ识别不同的启动子 σ70：辨认一般转录起始点 σ32：辨认原核生物热休克 基因的转录起始点 　真核生物热休克蛋白（heat shock protein, Hsp）与σ32高度同源;全酶（?2???）参与转录水平的调控； 核心酶（?2??）识别转录终止信号，停止聚合反应。;3.特点 聚合速率慢，30 ~ 50 NTP/s 无外切酶活性，无校对功能，错误率10-6 β亚基可被利福平，利福霉素结合、抑制;（二）真核生物RNA聚合酶;RNA pol Ⅱ;RNA pol Ⅲ;三 启动子和终止信号;（一）启动子（promoter）;1.原核生物启动子;;增强子（enhancer） 静息子（silencer）;（二）终止信号（terminator）;;（一）原核生物转录的起始;全酶催化与模板配对结合的头两个NTP（GTP多见，或ATP）以磷酸二酯键相连成 5-pppGpN-OH-3，转录泡变为转录起始复合物RNApol(?2???)-DNA-pppGpN-OH。 σ因子脱落，核心酶变构，与模板链结合变松，沿 DNA滑动。;（二）原核生物转录的延长;（二）原核生物转录的延长;（三）原核生物转录的终止;1.非依赖ρ因子的终止 ;2.依赖?因子的终止;（四）真核生物转录特点;顺式作用元件（cis-acting element） 转录上游区与转录相关的DNA序列。 反式作用因子（trans-acting factor） 能直接或间接辨认、结合转录上游区段DNA的蛋白质。 转录因子（transcriptional factor, TF） 能直接或间接结合RNA pol的反式作用因子。;TFIID结合TATA盒 RNA聚合酶结合TFⅡD，形成闭合的复合物 其它TF与RNA聚合酶形成开放的复合物;参与RNA polⅡ转录的TFⅡ;Department of Genetics and Molecular Biology ;参与RNA polⅢ转录的TFⅢ;转录终止的修饰;第二节转录后的加工修饰;转录生成的前体RNA，无生物学活性，需加工变为成熟、有活性的RNA。;Department of Genetics and Molecular Biology ;Department of Genetics and Molecular Biology ;Department of Genetics and Molecular Biology ;Department of Genetics and Molecular Biology ;卵清蛋白基因成熟mRNA与基因DNA杂交电镜所见;1043;外显子（exon） 原初转录产物通过剪接反应，保留于成熟RNA中的序列，在基因中对应的DNA序列。 内含子（intron） 原初转录产物通过剪接反应，被去除的RNA序列，在基因中相应的DNA序列。;一 真核生物mRNA前体的加工;卵清蛋白mRNA的生成过程;1. 5′末端加帽;功能;2. 3′末端加尾;功能;3.剪接（splicing）;snRNA（small nuclear RNA） 长100 – 300nt，已发现U1、U2、U4、U5、U6。 并接体（splicesome）　snRNA和核内蛋白质构成的核糖核蛋白（snRNP）。能结合hnRNA内含子区段，使内含子弯曲，3′和5′靠近，利于剪接。;;Department of Genetics and Molecular Biology ;Department of Genetics and Molecular Biology ;Department of Genetics and Molecular Biology ;大鼠降钙素基因转录体在甲状腺及脑中的不同剪接;MSH:促黑激素 ACTH：促肾上腺皮