活性维生素d3对uuo大鼠肾间质tgf-β1smads信号轴核酸表达的影响-effect of active vitamin d _ 3 on the expression of tgf - β _ 1 smads signal axis nucleic acid in uuo rat renal interstitium.docx

缩略词简表缩写英文全称中文全称RIFrenalinterstitialfibrosis肾间质纤维化1,25-(OH)2D31,25-dihydroxyvitaminD3活性维生素D3UUOunilateralureteralobstruction单侧输尿管梗阻TGF-β1Transforminggrowthfactor-β1转化生长因子β1VDRVitaminDReceptor维生素D受体ESRDEndstageofrenaldisease终末期肾脏疾病ECMextracellularmatrix细胞外基质RASrenin-angiotensinsystem肾素-血管紧张素系统EMTepithelial-mesenchymaltransformation上皮细胞间充质细胞转变HGFhepatocytegrowthfactor肝细胞生长因子IGF-1insulin-likegrowthfactor胰岛素样生长因子-1BMP-7bonemorphogeneticprotein-7骨形态发生蛋白-7CTGFconnectivetissuegrowthfactor结缔组织生长因子PDGFplatelet-derivedgrowthfactor促血小板源性生长因子TNF-αtumournecrosisfactor肿瘤坏死因子VEGFvascularendothelialgrowthfactor血管内皮生长因子LNlaminin层粘连蛋白NF-κBnuclearfactor-κB核因子-κBMMP-9matrixmetalloproteinase-9基质金属蛋白酶-9活性维生素D3对UUO大鼠肾间质TGF-β1/Smads信号轴核酸表达的影响摘要目的：肾小管间质纤维化是大多数肾脏疾病发展致终末期肾衰的共同病理特征之一。转化生长因子-β1(TGF-β1)作为重要的致纤维化因子，在肾小球疾病和肾小管间质病变发生和发展过程中发挥着重要的作用。1,25-(OH)2D3是体内维生素D分别经过肝、肾羟化作用后的活性形式，除具有经典的调节钙磷代谢和骨矿化作用外，其在肾组织中还具有阻止上皮细胞向间质转分化、抑制炎症反应、抑制肾素血管紧张素系统和改善胰岛素抵抗等作用。本实验通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法，检测单侧输尿管结扎所致的幼年大鼠肾间质纤维化（UUO）模型中TGF-β1、Smad3、Smad7的mRNA表达趋势及所测各指标间的相关性，以及应用活性维生素D3干预后各指标的变化情况，并评价活性维生素D3对肾间质纤维化的保护作用。方法：选取3-4周龄幼年SD雄性大鼠54只，随机均分为三组，分别为假手术组、UUO模型组、活性维生素D3干预组，每组各18只，模型组和干预组采用单侧输尿管结扎法制备肾间质纤维化模型，假手术组只分离不结扎输尿管。术后第一天起，干预组给予活性维生素D3(0.1ug/kg?d)溶于0.2ml花生油中灌胃，假手术组和模型组给予等量花生油灌胃，灌胃满3、7、14天后每组随机选取6只大鼠处死，留取左肾组织，采用RT-PCR法检测各组肾组织中TGF-β1、Smad3、Smad7的mRNA表达趋势，所有实验数据以X±s表示，采用SPSS17.0统计软件进行统计学分析。结果:1.采用单侧输尿管结扎术制备肾间质纤维化模型成功，结扎侧肾脏体积明显变大，皮质变薄。2.采用RT-PCR法检测各组各时间点肾组织中TGF-β1、Smad3、Smad7的mRNA表达情况：假手术组：TGF-β1和Smad3mRNA仅有少量基础表达，Smad7mRNA有丰富的表达，各时间点组内比较差异均无统计学意义（P0.05）。UUO模型组：随着梗阻时间的延长，肾组织中TGF-β1和Smad3mRNA表达显著性增加，Smad7mRNA表达逐渐减少，组内各时间点比较差异有显著性（P0.01）；与假手术组相比，肾组织TGF-β1和Smad3mRNA的表达有所增加，Smad7mRNA的表达有所减少，同时间点组间比较差异有显著性（P0.01）。活性维生素D3干预组：随着梗阻时间的延长，TGF-β1mRNA、Smad3mRNA的表达逐渐减少，而Smad7mRNA的表达呈增高趋势，组内各时间点比较差异有显著性（P0.01）；TGF-β1mRNA、Smad3mRNA的表达仍高于假手术组，低于UUO模型组，而Smad7mRNA的表达低于假手术组，高于UUO模型组，组间同时间点相比差异有显著性(P0.01)。3.相关性分析：UUO模型组中Smad3与TGF-β1成正相关关系（r=0.927）；Smad7与TGF-β1比成负相关关系（r=-0.960）；Smad3与Smad7成负相关关系（r=-0.924）。结论：1.在幼年大鼠肾间质损伤过程中，TGF-β1/Smads信号通路可能具