脊髓mcp-1调控fractalkine分泌致大鼠骨癌痛神经免疫机制-spinal mcp - 1 regulates the neural immune mechanism of bone cancer pain in rats induced by fractkin secretion..docx

脊髓MCP-1调控Fractalkine分泌致大鼠骨癌痛的神经免疫机制中文摘要morpholinurea-leucinehomophenylalanine-vinylphenylsulfone（LHVS）对骨癌痛大鼠疼痛行为学影响，并通过免疫组化和ELISA方法检测脊髓OX-42、FKN的表达和脑脊液中FKN水平变化。结果建模后10～12d连续鞘内注射LHVS后部分逆转骨癌痛大鼠机械性痛觉过敏反应（P0.01），并且减少脊髓OX-42的表达（P0.01），同时大鼠脑脊液中FKN表达水平下降（P0.01）。结论CatS通过介导FKN分泌参与大鼠骨癌痛的发展。[关键词]CathepsinS；Fractalkine/CX3CR1；骨癌痛；脊髓；小胶质细胞；大鼠第四部分MCP-1通过p38MAPK通路调控神经元Fractalkine分泌致大鼠骨癌痛目的探讨MCP-1是否通过p38MAPK通路调控神经元Fractalkine分泌致大鼠骨癌痛。方法采用雌性SD大鼠，建立胫骨癌痛模型，按照研究目的进行相应的实验分组，并通过疼痛行为学（n=8）、Real-timePCR（n=4）、Western-Blot（n=4）、免疫组织化学（n=4）和ELISA（n=4）方法进行以下研究：1、观察鞘内注射MCP-1中和抗体对骨癌痛大鼠脊髓p38、CX3CR1表达和脑脊液中FKN分泌的影响；2、观察鞘内注射MCP-1对正常大鼠脊髓p38、CX3CR1表达的影响；3、观察鞘内注射p38MAPK抑制剂4-(4-fluorophenyl)-2-(4-methylsulfinylphenyl)-5-(4-pyridyl)-1H-imidazole(SB203580)对骨癌痛大鼠疼痛行为学影响和脊髓CCR2、CX3CR1的表达及脑脊液中FKN分泌的变化。结果1、建模后10～12d鞘内连续注射MCP-1中和抗体显著减少骨癌痛大鼠脊髓p38mRNA和蛋白表达（P0.01），及CX3CR1mRNA和蛋白表达（P0.01）；同时明显降低了脑脊液中FKN的水平（P0.01）。2、正常大鼠鞘内给予外源性MCP-1后明显增加p38和CX3CR1的蛋白表达水平（P0.01）。3、骨癌痛大鼠鞘内注射SB203580明显抑制大鼠骨癌痛的产生（P0.01）；并可明显减少骨癌痛大鼠CCR2和CX3CR1的表达（P0.01）及脑脊液中FKN的水平（P0.01）。结论MCP-1可能通过激活p38MAPK通路介导神经元FKN分泌，进而作用于小胶质细胞CX3CR1受体参与大鼠骨癌痛。[关键词]p38MAPK；MCP-1/CCR2；Fractalkine/CX3CR1；骨癌痛；脊髓；大鼠作者：胡计嬅指导教师：杨建平教授英文摘要脊髓MCP-1调控Fractalkine分泌致大鼠骨癌痛的神经免疫机制NeuroimmunologicMechanismofSpinalMCP-1ModulatingtheReleaseofFractalkineinRatModelofBoneCancerPainAbstractWehavedescribedourmimicratmodelofbonecancerpain.Basedonthat,wepreviousstudieshavedemonstratedthatfractalkine,anewlydiscoveredchemokine,isimplicatedinspinalcordneuron-to-microgliaactivationsignalingaswellasmediationofbonecancerpainviaitssolereceptorCX3CR1,whichisspecificallyexpressedonmicroglia.Recently,ithasbeendemonstratedthatchemokineMonocytechemoattractantprotein-1(MCP-1，CCL2)/CCR2playsacriticalroleinpathologicalpainvianeuron–gliacommunication,resultingincentralsensitization;andregulatescirculatingmonocytesFractalkine/CX3CR1expressionandfunction.However,whetheritisinvolvedinbonecancerpainwhichisuniqueanddistinctfromneuropathicpain,andtheunderlyingmechanismshavenotbeenelucidated.Therefore,wespeculatedt