家蚕储存蛋白storage proteinsp3基因克隆及调节黑化作用的研究-cloning of storage protein sp3 gene of silkworm and its regulation of blackening.docxVIP

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2018-05-28 发布于上海
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家蚕储存蛋白storage proteinsp3基因克隆及调节黑化作用的研究-cloning of storage protein sp3 gene of silkworm and its regulation of blackening.docx

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家蚕储存蛋白storage proteinsp3基因克隆及调节黑化作用的研究-cloning of storage protein sp3 gene of silkworm and its regulation of blackening

中文摘要家蚕储存蛋白Storageprotein（SP3）基因克隆及调节黑化作用的研究BmBGRPB2，BmPPO2，BmDDC）在siRNA片段干扰后的表达水平，结果显示，BmPPAE，Bmserpin-3的表达量增加，BmBGRP1，BmBGRPB2的表达则下降，BmPPO2，BmDDC的表达量略下降。关键词：家蚕；sp3基因；黑化作用；RNAi作者：何渐鸣指导老师：许雅香CloningStorageprotein(SP3)genefromBombyxmoriandresearchingSP3regulatemelanizationreactionAbstractCloningStorageprotein(SP3)genefromBombyxmoriandresearchingSP3regulatemelanizationreactionAbstractStorageprotein(SP)isstorageproteininBombyxmori.Usuallysynthesisinfatbodyoflarvaeandthenreleasedintothebloodlymph.Takingsilkwormasmaterial,theStorageproteingene(sp3)ofsilkwormutilizingcDNAparedwithotherinsectsaminoacidsequence，testedthesp3genesonthedistributionoftheageof4and5instarssilkwormthreedaysinthefatbody,hemolymph,midgut,silkglands,testis,ovary,epidermis,testedthesp3genesonparticipatingmelanizationreactioninducedbyexogenoussiRNA，themainresultswereasfollows:cloningandsequenceanalysisofsp3fromBombyxmoriSp3wasamplifiedbyPCRutilizingcDNAderivedfromfatbodyofsilkwormastemplate.ThesequenceanalysisdisplayedthattheopenreadingframeofBmsp3genewithalengthof2091bpcoding696aminoacids;withapredictedsignalpeptideconsistingofthefirst27-74residues.Thecalculatedmolecularmassandisoelectricpointofthematureproteinwere82.10kDaand5.90,respectively.ThenucleicacidandaminoacidsequenceofBmsp3wasalignedwithotherpreviouslyidentifiedinsectstorageprotein,suchasManducasexta,Helicoverpaarmigera,Papilioxuthus,theresultsshowedthatthenucleicacidsequencealignmenthomologyisabove75%,andBombyxmorisp3matureproteinrevealedthehighestsimilaritywithaminoacidsequenceofthem.Aswithbeta-arylstorageproteinsubunitshomologywas62.5%,arylstorageproteinhomologyisabove53.4%,thelarvaeserumprotein1homologyof60.6%.Bmsp3tissuespecificexpressionAnalysisBmsp3transcriptionleveloftheageof4and5instarssilkwormthreedaysinthefatbody,hemolymph,midgut,silkglands,testis,ovary,epidermis,theresultsshowedthatsp3inthesilkwormlarvastagesorganizationsallhavedistribution,themostabundantinthebloodandthefatbody,and5instarsofthecontentofsp3to4agemoregenerally.Abst