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问题探讨:图示“嫁接”了人胰岛素基因的工程菌,能大量合成人胰岛素,用来治疗糖尿病等,使胰岛素的生产成本大大降低。 3、基因工程与环境保护 利用转基因细菌降解有毒有害的化合物,吸收环境中的重金属,分解泄露的石油,处理工业废水等。 选择育种、杂交育种、诱变育种等传统的育种方法,只能在同种生物中进行,很难将一种生物的优良性状,移植到另一种生物身上。而基因工程的出现使人类有可能按照自己的意愿直接定向地改变生物,培育出新品种。 基因工程的优点: 1、定向改变生物(目的性强) 2、克服远缘杂交不亲和的现象 例1、能够使植物体表达动物蛋白的育种方法是 ( ) A.单倍体育种 B.杂交育种 C.基因工程育种 D.多倍体育种 C 思考1、细菌和人是差异很大的两种生物,为什么能把人的胰岛素基因“嫁接”到细菌上,并合成人的胰岛素? 转入人胰岛素基因的大肠杆菌 提示:基因表达的过程? 细菌和人的遗传物质? 密码子的特点? 思考2、怎样才能实现这种嫁接? 目的基因 供体细胞 受体细胞 能够分泌胰岛素 人体细胞 普通大肠杆菌 取出胰岛素基因 转基因大肠杆菌 表达 基因工程 不能分泌胰岛素 一、基因工程的概念: 又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。 理解: 环境:生物体外 对象:基因 水平:DNA分子 原理:基因重组 基因是很小的分子,将其从一种生物转移到另一种生物,需要什么特别的工具? 1、基因的“剪刀”—限制性核酸内切酶(限制酶) 磷酸二酯键 作用: 特性: 结果: 二、基因工程的基本工具 识别并切割DNA分子 专一性:识别特定核苷酸序列 特异性:在特定的切点切DNA 产生两个黏性末端 (特点?) 限制酶 如大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开。 什么叫黏性末端? 被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 例2、使用EcoRI 剪切目的基因 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 目的基因 黏性末端 2、基因的针线——DNA连接酶 作用:把黏性末端之间的缺口“缝合”起来,即连接脱氧核糖和磷酸之间的磷酸二酯键 结果:形成重组DNA分子 磷酸二酯键 基因的针线:DNA连接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同种限制酶切割 例3、下列是由限制酶切割形成的DNA片段,能用相应DNA连接酶将它们恢复连接的组合是( ) ①…CTGCA …G ②—G —CTTAA ③ G— ACGTC— ④ AATTC— G— A. ①③;②④ B. ①②;③④C. ①④;②③ D.以上都不对 A ?外源基因(如胰岛素基因)怎样才能导入受体细胞(如大肠杆菌细胞) 3、基因的运载体 *质粒存在于许多细菌以及酵母菌等生物中,是拟核或细胞核外能够自主复制的很小的环状DNA分子 作用:将外源基因导入受体细胞 种类:质粒、噬菌体、动植物病毒 1)提取目的基因 2)目的基因与运载体结合 3)将目的基因导入受体细胞 4)目的基因的检测和表达 三、基因工程的操作步骤 三、基因工程的操作步骤 小结:基因工程操作基本步骤 例4、下列有关基因工程操作的正确顺序是( ) ①目的基因的检测和表达
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