药敏试验(扩散法)操作方法34页.pptVIP

药物因素 药物的溶解性 易溶于水的药物易扩散，难溶性药物就不易扩散 药物的稳定性 如水解（某些β—内酰胺类药物）、PH值（青霉素钠遇酸碱分解、红霉素遇酸不稳定） 药物的抗菌机理 杀菌药物 环边沿明晰 抑菌药物 环边沿模糊—细菌恢复生长—环缩小 杀菌药物 氨基糖苷类、喹诺酮类等。 抑菌药物 磺胺类、红霉素类、林可霉素、四环素类、氯霉素类等 离子的影响 喹诺酮类、四环素类、泰乐菌素等药物在Ca、Mg等阳离子的作用下（一般是形成不溶性络合物）抗菌作用降低或丧失。 适宜的PH值 氨基糖苷类在弱碱情况下抗菌作用稍有增强 药物在体内外作用有别 只有在体内进一步分解（或转化）后才能表现出抗菌作用 细菌因素 细菌层的薄厚 细菌的生长特性 培养基 培养基厚度 水的质量 PH值 培养基成分 培养条件 培养时间的长短 培养温度 药敏片 药物含量的多少 试纸片材质 应用 1、在选择高敏药物时还应考虑药物的吸收途径。高敏药物一定要配合适宜的给药方法。 2、药敏试验结果仅为临床选择高敏药物的参考。药敏试验与临床治疗效果的符合率一般为70－80%。如发现疗效不显著应及时换药。 3、药敏试验确定的首选药物不是一成不变。要定期进行药敏试验。 4、窄谱抗生素能解决的问题不选广谱抗生素，一种抗生素可达到治疗作用时，不要用两种药物联合应用。必须应用两种抗生素时，应选择联合应用具有协同作用的药物。 5、避开已经使用过的药物或其同类药物，发病期间已用过的药物或同类药物一般不用。 6、加强饲养管理，提高卫生条件，能起到很好的辅助治疗作用 感谢以下文献作者： 禽传染病实验诊断技术 复方兽药的药敏试验(药敏片法)与药物选择 基层兽医临床中药敏试验方法 分析药敏试验影响因素指导临床用药 兽医临床纸片法药敏试验结果的影响因素 依赖药敏试验治疗鸡大肠杆菌病的误区 基层兽医药敏试验操作的调查分析 WST 125-1999 纸片法抗菌药物敏感试验标准 药敏试验（扩散法）操作方法 内容: 一、药物敏感试验的目的与意义 二、常用的药敏测定方法 三、试验准备及用品 四、药敏试验操作步骤 五、结果观察 六、影响药敏结果的因素 一、概念 抗菌药物敏感性试验（AST，简称药敏试验）：用于测试抗菌药物在体外对病原微生物有无抑制作用。 （1）MIC：体外能够抑制细菌生长的最低药物浓度，临床医师可以根据MIC确定药物剂量。通常达到稳态的血药峰浓度（Css）max应为MIC的4-8倍，重症感染以大于8倍为妥。 （2）为方便临床给药，根据MIC提供一个定性的结果是必要的。临床医师根据敏感、中介、耐药的提示结合MIC可以方便地制定用药方案。 敏感（S）：表示该药物对细菌的MIC值低于常规剂量下的抗菌 药物血液浓度或组织浓度4-8倍，可以用常规剂量治愈。 中介（I）：表示该药物对细菌的MIC值接近于常规剂量给药后的血药浓度或组织药物浓度，细菌对该药的敏感性降低，但仍可用于生理性浓集部位的感染或使用高剂量药物进行治疗（注：必须考虑高剂量的安全性）。 耐药（R）：表示该药物对细菌的MIC值等于或高于常规剂量下药物的血液浓度或组织浓度，细菌不能被该种药物抑制。 意义： 1、检测病原菌对各种抗生素的敏感性，指导临床合理用药。避免盲目用药、滥用药、大剂量用药。 2、监测耐药性，分析耐药菌变迁，了解某一地区致病菌的耐药变迁、流行病学调查及监控，控制和预防耐药菌株的流行 3、为经验用药提供所选药物的参考依据，可预测抗菌治疗的效果。“敏感”治疗可能有效；“耐药” 肯定失败 4、新抗菌药的研究 以下情况不需进行药敏测定： 标本污染细菌，非致病菌引起 已知某些抗菌药对某菌有良好的抗菌作用且很少有耐药菌产生 已知细菌全部耐药的药物 对营养要求高而不易生长的细菌 二、常用的药敏测定方法 1、扩散法：纸片法、牛津杯法、打孔法等。 纸片法 手工测试的方法，通过测试药物纸片在固体培养基上的抑菌圈的大小，判断细菌对该种药物是否敏感。目前临床上广泛使用此法。定性 2、稀释法：琼脂稀释法、液体稀释法（试管、微量） 通过测试细菌在含不同浓度药物培养基内的生长情况，判断其最低抑菌浓度（MIC）。自动化仪器均采用液体稀释法为药敏试验的方法。 定量 3、E测定法（E test）： 与扩散法相似，但药物包被于长塑料条上，能够精确测定MIC值。适于一些特殊病原菌的药敏测试，但价格较为昂贵。 4、全自动药敏仪法： 三、试验准备及用品 药品（单品药、药厂的成品药、中药）、恒温培养箱、药敏片、培养基、平皿（直径90mm）、烧杯、蒸馏水、滤纸、打孔器（文具店有售）、 0.5麦氏比浊管配制方法： 0.0