sp04第四章 节 微生物的遗传变异和育种3 第三节 基因重组和杂交育种 食品微生物学课件.ppt

第三节 基因重组和杂交育种 ;微生物中各种形式基因重组的比较 ;一、原核微生物的基因重组 ;（一）转化（transformation）;;5. 转化微生物的种类： 原核生物： Streptococcus pneumoniae, Bacillus sp. Rhizobium sp. Staphylococcus sp. Pseudomonas sp 真核生物： Saccharomyces cerevisiae Neurospora crassa Aspergillus niger 在实验室中的操作： E. coli可以CaCl2处理成球状体；真菌制成原生质体。 ;;;小总结;;;;;（二）转导（transduction）;;2.1 普遍转导（complete tranduction） 普遍转导：通过完全缺陷噬菌体对供体菌基因组上任何DNA小片段的“误包”，而实现其遗传性状传递至受体菌的转导现象，称为普遍转导。 一般用温和噬菌体作为媒介。 分为： ①完全普遍转导； ②流产普遍转导。;①完全普遍转导（complete transduction） ：简称完全转导。由完全不含噬菌体自身DNA的假噬菌体－完全缺陷噬菌体把外源DNA片段导入受体细胞内。;;②流产普遍转导：简称流产转导（abortive transduction），经转导而获得了供体菌DNA片段的受体菌，如果外源DNA在其内既不进行交换、整合和复制，也不迅速消失，而仅进行转录、转译和性状表达，这种现象就称流产转导。 ;;局限性转导;;不正常切离会将插入位点两侧之一的少数宿主基因连接到噬菌体DNA上，就形成了一种特殊的噬菌体，即缺陷噬菌体。 由于宿主染色体上进行不正常切离的频率极低，因此所形成的裂解物中所含的噬菌体的比例极低 低频转导（LFT） 裂解物的形成 → 低频转导（LFT）裂解物去感染受体菌（低的感染复数） → 形成局限转导子。 ;;举例：;;;复习;;（三）结合（conjugation） ;1946年，Lederberg和Tatum 在实验中成功地发现了细菌的接合现象。他们用大肠杆菌K12的两个营养缺陷型菌株混合培养。;;F质粒结构及其在细胞中的存在状态 F质粒的遗传结构： 双链环状DNA分子，DNA长度为99159bp。 F质粒的结构整个基因组由三个主要区段组成： （1）转移区 （2）复制区 （3）插入区 F质粒在细胞内的存在形式 ：四种类型：F-、F+、Hfr、F’ ;1. 接合概念;;;四种接合型E. coli菌株（F质粒在细胞内存在方式）;F质粒四种存在方式及相互关系：;F+（“雄性”）菌株;Ｆ因子的传递过程（接合的具体过程）为：;F-（“雌性”）菌株;Hfr（高频重组）菌株;;Hfr与F-菌株间的接合中断试验;中断杂交实验和基因定位 ;接合中断法;F’ 菌株;;细菌基因交流的主要方式;（四）原生质体融合（protoplast fusion）;1、选择具有遗传标记的亲株 为了有利于重组子的检出，必须选择已知的或用诱变方法获得的营养缺陷型或抗药性标记菌株作为亲株，同时要求标记必须稳定。;;二、真核微生物的基因重组 ;（一）有性杂交（sex hybridization）;;双、单倍体酵母细胞的比较;有性杂交的实例;（二）准性杂交（parasexual hybridization）;;准性生殖与有性生殖的比较;;准性杂交原理;三、基因工程 ;一、基因工程的定义;二、基因工程的基本操作;1. 目的基因的取得 一般有三条途径：①从适当的供体细胞（各种动物、植物及微生物均可）的DNA中分离； ②利用反转录酶的作用由mRNA合成cDNA；③由化学方法合成特定功能的基因。;三、基因工程的应用和发展前景