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遗传学课件第三章 节 遗传物质的分子基础.ppt
第四节 DNA的复制 一、DNA复制的特点 (一)半保留复制 复制子:同一个复制起点控制下合成的一段DNA序列。 绝大多数细菌和病毒,只有一个复制起点,控制整个染色体的复制,整个染色体也就是一个复制子。 真核生物中,每条染色体的DNA复制则是多起点的,多个复制起点共同控制一条染色体的复制,即每条染色体有多个复制子。复制起点具有特殊的DNA序列特征。 (二)复制起点(原点)和复制方向 复制方向:多数原核生物环状DNA是双向复制(都是5,—3,),最后相遇,完成复制。绝大多数真核生物DNA呈线状,其复制也是双向的。 但近来发现,P2噬菌体DNA的复制是单方向的。 二、原核生物DNA的合成 (一)有关DNA合成的酶 DNA聚合酶(I,II,III),解旋酶,单链DNA结合蛋白,拓扑异构酶(I,II),RNA聚合酶,DNA引物酶,连接酶等 (二)DNA复制的过程 DNA的合成是半保留复制,复制是双向的,合成必须有引物的引导,并且复制时链的延伸总是从5’向3’方向进行。 1、DNA双螺旋的解链 DNA复制前必须先解开双螺旋。大肠杆菌中,DNA的合成速度约为每分钟30,000bp,DNA链每分钟必须旋转约3000次才能使双链解开。 DNA的解旋过程由DNA解旋酶催化完成,由ATP提供解旋所需的能量。DNA双链解开后,单链DNA结合蛋白马上结合在分开的单链上,保持其伸展状态。 解旋过程中,在DNA复制叉前面形成一种张力,导致超螺旋的产生。这种张力的消除主要由DNA拓扑异构酶完成:将DNA双链切开一个口子,使一条链旋转一圈,然后再将其共价相连,从而消除其张力。 2、DNA合成的开始 三种DNA聚合酶不能直接起始DNA的合成,而需要一段RNA作为引物。以DNA为模板,在一种特殊的RNA聚合酶-DNA引物酶的催化下,先合成一段长度为10~60个核苷酸的RNA引物,提供3’端自由-OH。然后,在DNA聚合酶Ⅲ的作用下进行DNA的合成。 3、链的延伸:一条连续,一条不连续 两条新链的延伸过程中,一条是连续的,另 一条是不连续的。把一直从5’ - 3’方向延伸的链称作前导链,它是连续合成的。而另一条先沿5’-3’方向合成一些片段,然后再由连接酶连起来的链,称为后随链,其合成是不连续的。这种后随链上合成的DNA不连续单链小片段称为冈崎片段。 前导链上,DNA引物酶只在起始点合成一次引物RNA;而后随链上,每个“冈崎片段”的合成都需要先合成一段引物RNA,然后DNA聚合酶III才能进行DNA的合成。 随后,引物RNA被切除,并被新合成的DNA片段所替代。大肠杆菌中,DNA聚合酶I催化完成此过程。 最后DNA连接酶将“冈崎片段”连起来,形成一条完整的新链。 三、真核生物DNA合成的特点 只发生在细胞周期的S期,而原核生物则在整个细胞生长过程都可进行DNA合成。 原核生物DNA的复制是单起点的,而真核生物染色体的复制则为多起点。 RNA引物及后随链上合成的“冈崎片段”的长度比原核生物要短。原核引物约10~60 base,“冈崎片段” 为1000 ~ 2000 base ;真核引物只有10个核苷酸,“冈崎片段” 约为原核的1/10。 两种不同的DNA聚合酶分别控制前导链和后随链的合成。原核中有DNA聚合酶I、II和III,并由聚合酶III同时控制两条链的合成。而真核中共有α、β、γ、δ、ε五种DNA聚合酶,α和δ是DNA合成的主要酶,聚合酶α控制不连续的后随链合成,而聚合酶δ控制前导链合成。 染色体端体的复制:真核生物线状染色体新链5’末端DNA无法自动合成。现在有证据表明,在DNA的末端存在特殊的结构,并在含有RNA的端体酶的催化下完成末端的合成。 第五节 RNA的转录及加工 遗传物质必须具有遗传、表达和变异三种基本功能。DNA的结构及其复制,即遗传功能;而它的第二个重要功能就是基因表达。基因表达,首先是DNA转录为RNA,然后由RNA再翻译成蛋白质。 一、三种RNA分子 mRNA:把DNA上的遗传信息转录下来,然后由其碱基顺序决定蛋白质的氨基酸顺序。 tRNA:把氨基酸搬运到核糖体上。每种氨基酸可与1~4种tRNA相结合,tRNA种类在40种以上。 rRNA:与核糖体蛋白质结合,形成核糖体。 大肠杆菌中,rRNA占总RNA量的75~85%。tRNA占15%,mRNA仅占3~5%。 三种RNA分子均为转录产物,mRNA最后翻译为蛋白质,而rRNA、tRNA并不翻译,其终产物即为RNA。 二、RNA合成的特点 RNA合成与DNA合成相比,有三个不同之处: (1)所用原料为NTPs而不是dNTPs (2)只有一条DNA链被用作模板。用作模板、进行R
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