魏氏梭菌及其主要毒素的研究进展 讲解材料.pptVIP

β2毒素 1997年Gibert等首先从来自仔猪坏死性肠炎病例的培养上清中分离纯化到这种C型产气荚膜梭菌(CWC245)毒素 β2毒素与家畜的梭菌性胃肠道疾病有关 β2毒素在猪的胃肠道疾病中发挥了一定作用 β2毒素基因存在于质粒上 研究刚起步 Logo 魏氏梭菌及其主要毒素的研究进展 报告内容 魏氏梭菌概述 魏氏梭菌毒素研究 综述 分型及其依据 魏氏梭菌产生的毒素 四种主要毒素研究进展 纯化及鉴定 细菌毒力 综述 革兰氏阳性有荚膜不运动的厌氧大杆菌，芽孢椭圆形,位于菌体中央或次极端，芽胞直径不大于菌体，在一般培养时不易形成芽胞，在无糖培养基中有利于形成芽胞（菌体形态） 广泛分布于自然界，同时也是肠道中的常见菌之一，在一定条件下，可引起各种严重疾病 发病急、死亡快，因此对于本病的防制主要用疫苗进行免疫预防 危害：猝死症，家禽坏死性肠炎，人食物中毒及气性坏疽 ；家畜肠毒血症、坏死性肠炎，痢疾 培养特性 本菌虽属厌氧性细菌，但对厌氧程度的要求并不太严，2%~10%的CO2条件下，生长更好 在普通培养基上能生长，若加葡萄糖，血液，则生长更好 生长适宜温度为37-47℃，多认为43-47℃为最宜温度，在适宜条件下增代时间仅8min 培养特性 血平板：双层溶血环 内环完全溶血-θ毒素 外环不完全溶血- α毒素 蛋黄琼脂平板：Nagler反应 庖肉培养基：数小时即可见到生长，产生大量气体，肉渣或肉块变为略带粉色，但不被消化 牛乳培养基：“汹涌发酵”（stormy fermentation） 气性坏疽发病急剧，后果严重，需要尽早准确的做出微生 物学诊断，争取早期治疗： 标本 镜检：可发现G＋大杆菌，并伴有其他杂菌和少量形态 不规则的白细胞。 培养基 厌氧培养 进一步鉴定: 牛乳培养基 生化反应：TSC 动物实验：泡沫肝实验  分离诊断 纯化 液体培养基 65-70°C半小时 43°温箱培养 3-4小时 连续传代 镜检 TSC.石蕊牛奶 血平板 侵袭力：病原菌有突破宿主皮肤、黏膜  生理屏障等 免疫防御机制，进 入体内定居、繁殖和扩散的能 力，包括荚膜、粘附素和侵袭 性物质。 毒素：含有损害宿主组织、器官并引起生理功能紊乱的大分子成分。 毒力 细菌的毒力 荚膜、微荚膜。 　　　黏附素：细菌表面的蛋白质。　　　　　　 菌毛分泌物　　　　　　 细菌的表面组分：如磷壁酸。 2、侵袭性物质：协助病菌抗吞噬或向四周扩散。如致病性葡萄球菌凝固酶、A群链球菌透明质酸酶、链激酶等从而有利于细菌在组织中扩散。 ㈠侵袭力 1、菌体的表面结构 　　　　细菌在生长繁殖中产生和释放的毒性成分，可直接或间接损伤宿主细胞、组织和器官，干扰其生理功能。 外毒素 内毒素 （二）毒素 内毒素毒性作用 (A)热源性 (C)内毒素血症和休克 (D)弥漫性血管内凝血（DIC） (B)白细胞数目改变 区别要点 外毒素 内毒素 存在部位 由活的细菌释放至细菌体外 为细菌细胞壁结构成份，菌体崩解后释出 细菌种类 革兰阳性菌多见 革兰阴性菌多见 化学组成 蛋白质 脂多糖 稳定性 60℃～80℃ 30 min破坏 耐热，160℃ 2h～4 h破坏 毒性作用 强，有选择毒害作用，引起特殊临床表现 稍弱，各种细菌内毒素的毒性作用大致相同。 抗原性 强，可刺激机体产生高效价的抗毒素。经甲醛脱毒成为类毒素，仍有较强的抗原性，可用于人工自动免疫 刺激机体对多糖成份产生抗体，不形成抗毒素，不能经甲醛处理成为类毒素 疫苗现状 梭菌类的疫苗有单价苗和多联苗，单价疫苗在实际应用中难以取得很好的效果，原因是致病的梭菌种类较多，而且有的是混合感染，单价苗往往是顾此失彼，不能有效地预防疾病。 国外相继出现了包括产气荚膜梭菌的四联、五联、七联和八联苗梭菌苗，不仅把梭菌苗联合起来，而且还把所梭菌苗与需氧菌苗(如巴氏杆菌苗、沙门氏杆菌苗)联合起来，甚至与病毒苗(如羊痘疫苗)联合起来进行防疫。 疫苗现状 国内首先出现的是羔羊痢疾，肠毒血症等单价苗，继之出现了羊猝狙、快疫二联苗，羊黑疫、快疫二联苗，快疫、羔羊痢疾、肠毒血症三联苗。文希喆等(1978)研制成功了快疫、羔羊痢疾、碎狙、肠毒血症、黑疫五联苗。纪金春等(1978)研制成功了快疫、羔羊痢疾、猝狙、肠毒血症、黑疫和肉毒中毒六联苗。 疫苗现状 上世纪70年代到80年代，中监所的文希喆