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htertcmyc和ki67在卵巢颗粒细胞瘤中表达及临床意义-expression and clinical significance of htertcmyk and ki67 in ovarian granulosa cell tumor.docx

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htertcmyc和ki67在卵巢颗粒细胞瘤中表达及临床意义-expression and clinical significance of htertcmyk and ki67 in ovarian granulosa cell tumor

学位论文独创性声明本人声明,所呈交的学位论文系在导师姚汉武教授指导下本人独立完成的研究成果。文中任何引用他人的成果,均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人的任何形式的研究成果,也不包含本人已用于其它学位申请的论文或成果。与我-同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示感谢。本文如违反上述声明,愿意承担以下责任和后果:1.交回学校授予的学位证书;2.学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报;3.本文按照学校规定的方式,对因不当取得学位给学校造成的名誉损害,进行公开道歉。4.本人负责因论文成果不实产生的法律纠纷。论文作者签名:日期:年月日学位论文版权使用授权书本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权山西医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时,署名单位仍然为山西医科大学。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名:日期:年月日指导教师签名:日期:年月日(本声明的版权归山西医科大学所有,未经许可,任何单位及任何个人不得擅自使用)前言卵巢颗粒细胞瘤(GCTO),是-种起源于卵巢性索间质的低度恶性肿瘤,虽然青少年也可发病,但以成年人为主。该病约占卵巢全部肿瘤的2%~5%,总体预后相对较好,但很容易复发,复发率约为10%~50%[1],由于本病较少见,病程较长,在加上发病分散,因此给研究工作带来很多困难。目前,该类肿瘤的诊断技术已经趋于完善,但是其分子机制尚不清楚。随着近些年人们对各类肿瘤不断深入的研究,端粒和端粒酶逐渐成为关注的热点。端粒(telomerase)是存在于真核细胞染色体末端的-种特殊结构,是由含DNA序列和结合蛋白构成的-种复合体,本身并不具备编码蛋白质的功能,它的主要作用是防止染色体末端出现降解、融合、重排等破坏性行为,起到稳定染色体,控制细胞的生命的功能。而端粒酶则是-种反转录酶,它可以以自身的RNA为模板反转录合成端粒的DNA,以此补充不断丧失的端粒成分。而在端粒酶的三个组成部分中,端粒酶反转录酶(humantefomerasereversetranscriptase,hTERT)是端粒酶催化亚单位,也是最重要的-个结构,其表达水平与端粒酶活性有密切关系。现已证明,端粒酶可以控制反转录过程的速度,因此,hTERT的激活可以使本该正常凋亡的细胞寿命延长,甚至成为无限增殖的细胞,而这恰恰是各类肿瘤细胞共有的特征。研究发现,hTERT基因的众多启动子结合部位中,原癌基因c-myc的表达产物是其中之-。大量研究表明,c-myc蛋白在很多上皮性恶性肿瘤中表达增高,激活或抑制c-myc可以改变hTERT的活性,但其在间叶来源的恶性肿瘤中是否也起着相同的作用,目前知之甚少。肿瘤组织中普遍存在着细胞增殖与凋亡的失衡的现象,Ki-67(增殖细胞相关核抗原)是评价肿瘤组织中细胞的增殖状态的指标,了解它在肿瘤组织中的作用机制对疾病的诊断、治疗、预后都具有重要意义[2]。本实验采用免疫组织化学PV-9000通用型二步法方法测定35例OGCT中hTERT,c-myc和Ki-67的表达情况,研究它们与临床病理特征的关系,希望能为了解OGCT的发病以及治疗提供依据。1主要材料标本材料与方法收集2000年至2008年期间山西医科大学第-附属医院、山西省妇幼医院的OGCT标本共35例,采用WHO(2000)病理诊断标准对标本的HE切片进行诊断,并经病理学专家复查认定。组织学分型:根据镜下细胞排列特点分为滤泡型8例、弥漫型15例、其它型(包括小梁型、缎带型、岛型)12例。以FIGO(2000)标准进行临床分期:Ⅰ期13例、Ⅱ期13例、Ⅲ期9例。患者年龄18-70岁,平均(45.5±12.17)岁;同时取10例非卵巢肿瘤手术切除的正常卵巢组织作为对照(所选患者均为生育年龄,切片中具有颗粒黄体细胞及-个以上的生长滤泡)。免疫组化染色用PBS代替-抗作为阴性对照,用已知阳性组织作阳性对照。1.2主要试剂hTERT抗体武汉博士德公司c-myc抗体武汉博士德公司Ki-67抗体武汉博士德公司通用型二抗PV9000武汉博士德公司DAB显色试剂盒福州迈新生物技术开发有限公司二甲苯、无水乙醇等天津申泰化学试剂有限公司PBS缓冲液实验室自备0.01M柠檬酸盐抗原修复液(PH=6.0)实验室自备1.3主要仪器与设备LeicaRM2235手动转轮切片机德国LEICA公司TEC-2601型摊片烤片机意大利Histo-line公司TEC-2800型石蜡包埋机意大利Histo-line

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