il17在阿尔茨海默病中的作用及机制研究-study on the role and mechanism of il17 in alzheimers disease.docx

目录中文摘要1Abstract2缩略词表4第一章引言51阿尔茨海默病52免疫炎症与AD63白细胞介素-17（IL-17）在AD中的作用7第二章材料和方法111实验材料112实验方法143统计学分析21第三章结果211IL-17对U251细胞存活率的影响212IL-17增加U251细胞合成和分泌炎症因子IL-1β233IL-17促进NF-κB的核转移254IL-17诱导U251细胞凋亡265IL-17诱导SH-SY5Y细胞凋亡27第四章讨论30第五章结论33参考文献34致谢36综述37L-17在阿尔茨海默病中的作用及机制研究中文摘要【目的】免疫炎症机制在阿尔茨海默病（Alzheimer’sdisease，AD）发生发展中的作用越来越受到重视，现有研究已经证实免疫炎症广泛参与了AD的病理过程。IL-17为新近发现的炎症因子，有证据显示其参与了包括AD在内的多种神经系统疾病的免疫炎症反应。但详细的作用和具体的机制尚不清楚，本研究通过体外细胞实验，观察分析IL-17的胶质细胞活化、促炎反应、神经元凋亡等作用，探讨IL-17在AD中的作用和机制。【方法】用适当浓度的Aβ1-42模拟AD环境体外培养神经胶质瘤细胞U251和神经母瘤细胞SH-SY5Y。运用MTT法、RT-PCR、Westenblot等技术观察不同浓度、不同时间IL-17对两种细胞存活率、IL-1β表达量、NF-κB活化、caspase-3表达情况的影响，以及封闭IL-17受体时这些指标的变化情况。所有数据应用SPSS20.0进行统计学分析。【结果】1.IL-17处理U251细胞6h，IL-1β表达在RNA和蛋白水平都显著增加（P0.05），封闭IL-17受体能够显著抑制IL-1β表达（P0.05）。2.IL-17处理2种细胞株，都在3h、6h时间点检测到NF-κB活化核转移（P0.05），封闭IL-17受体显著抑制NF-κB活化（P0.05）。3.IL-17处理2种细胞株，都在较晚的6h时间点检测到caspase-3表达，细胞存活率显著下降（P0.05），封闭IL-17受体能够显著抑制同时期caspase-3表达和细胞存活率下降（P0.05）。【结论】1.IL-17参与AD的免疫炎症反应，并且在AD的发生发展过程中起着重要作用。2.IL-17在AD的炎症早期阶段活化胶质细胞，对神经系统可能起保护作用。在AD炎症晚期阶段，胶质细胞持续活化，在IL-17的参与下诱导神经元和神经胶质细胞凋亡，加重AD的病理损伤。3.IL-17可能通过NF-κB信号通路激活胶质细胞，也有可能通过该信号通路激活caspase-3表达，诱导神经元和胶质细胞凋亡。4.调控IL-17的信号通路（受体、NF-κB等）的关键因子可能成为有前景的AD治疗新靶点。【关键词】阿尔茨海默病，免疫炎症，白介素17，核转录因子-κBStudyontheeffectandmechanismofIL-17inAlzheimersdiseaseAbstract【Objective】ThereisagrowingemphasisontheroleofimmuneandinflammatorymechanismsintheprogressionofAlzheimersdisease(AD),previousstudieshavedemonstratedthatinflammationresponsearewidelyinvolvedinthepathologicalprocessofAD.IL-17wasreportedtobeinvolvedintheimmuneinflammationresponseofADandavarietyofotherneurologicaldisorders.However,thespecificmechanismofactionisunclear.Inthepresentstudy,weperformedacellexperimentstoinvestigatetheeffectandmechanismofIL-17inAD.【Methods】U251andSH-SY5YcellswereculturedinvitrowithanappropriateconcentrationofAβ1-42.TheeffectofIL-17onbothcellviability,IL-1βexpressionlevels,NF-κBactivationandcaspase-3expressionlevelsweredetectedbyusingthemethodofMTT,RT-PCR,Westernblotetc.AllthedatawerestatisticallyanalyzedusingSPSS20.0