抗菌活性瑞士乳杆菌ajt的筛选鉴定及抗菌物质分析-screening and identification of antimicrobial activity lactobacillus helveticus ajt and analysis of antimicrobial substances.docx

下载文档 降价啦

20
0
约4.06万字
约 51页
2018-05-29 发布于上海
举报
版权申诉
保障服务

抗菌活性瑞士乳杆菌ajt的筛选鉴定及抗菌物质分析-screening and identification of antimicrobial activity lactobacillus helveticus ajt and analysis of antimicrobial substances.docx

1、本文档共51页，可阅读全部内容。
2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。

抗菌活性瑞士乳杆菌ajt的筛选鉴定及抗菌物质分析-screening and identification of antimicrobial activity lactobacillus helveticus ajt and analysis of antimicrobial substances

目录1引言11.1乳酸菌抗菌物质11.1.1酸性物质21.1.2乳酸菌素21.1.3二氧化碳31.1.4过氧化氢41.2细菌素的纯化41.3影响乳酸菌素抑菌活性的因素41.4抗菌活性瑞士乳杆菌研究现状51.5研究目的和意义61.6研究内容61.7试验路线62试验材料72.1菌种72.2培养基72.3主要试剂72.4主要仪器83试验方法83.1抗菌活性乳酸菌的筛选83.1.1乳酸菌活化83.1.2无菌上清液制备83.1.3指示菌的培养83.1.4指示平板的制备83.1.5抗菌活性菌株初筛93.1.6抗菌活性菌株复筛93.2菌种鉴定93.2.1菌体形态及菌落特征916SrDNA分子鉴定9API50CHL糖发酵试验103.3菌株AJT抗菌物质特性研究103.3.1无菌上清液抗菌趋势测定103.3.2抗菌物质效价测定103.3.3抗菌物质粗提103.3.4酸抑制作用的排除103.3.5过氧化氢干扰的排除113.3.6抑菌谱113.3.7热稳定性113.3.8pH稳定性113.3.9蛋白酶敏感性113.4抗菌物质的分离纯化113.4.1抗菌物质的有机溶剂萃取113.4.2抗菌活性检测123.4.3固相萃取柱纯化123.4.4纯化结果检验123.4.5特征紫外吸收光谱的测定123.4.6高效液相色谱纯化123.5发酵条件优化123.5.1不同培养基对抗菌物质活性的影响123.5.2最佳培养时间确定123.5.3最佳接种量确定123.5.4最佳培养温度确定133.5.5起始pH值确定133.5.6碳源、氮源优化133.5.7无机盐含量确定143.5.8金属离子含量确定143.5.9吐温-80含量确定143.5.10优化结果验证143.6数据处理144结果154.1抗菌活性乳酸菌的筛选154.1.1抗菌活性菌株的初筛154.1.2抗菌活性菌株的复筛174.2菌种鉴定174.2.1菌体形态及菌落特征1716SrDNA序列分析18API50CHL糖发酵试验204.3菌株AJT抗菌物质的特性研究214.3.1抗菌活性趋势214.3.2抗菌物质效价测定224.3.3酸抑制作用排除224.3.4过氧化氢作用排除234.3.5抑菌谱234.3.6热稳定性254.3.7pH稳定性254.3.8蛋白酶敏感性264.4菌株AJT抗菌物质的分离纯化264.4.1固相萃取264.4.2高效液相色谱纯化274.5菌株AJT发酵条件优化274.5.1菌株AJT产生抗菌物质的培养基筛选274.5.2最佳培养时间284.5.3最适接种量284.5.4最适培养温度284.5.5最适起始pH值294.5.6碳源、氮源优化294.5.7无机盐含量确定314.5.8金属离子含量确定324.5.9吐温-80含量确定334.5.10优化结果验证335讨论335.1抗菌活性乳酸菌筛选及菌种鉴定335.2抗菌物质特性研究345.3抗菌物质纯化355.4发酵条件优化356结论36致谢37参考文献38作者简介45插图和附表清单1.图1AJT菌体形态照片182.图2基因组DNA的提取183.图316SrDNA的PCR鉴定194.图4菌株AJT的16SrDNA序列195.图5菌株AJT的系统发育树206.图6菌株AJT生长曲线及抑菌活性227.图7过氧化氢酶处理后的抗菌物质对大肠杆菌的抑制作用238.图8菌株AJT对部分指示菌的抑制作用249.图9不同温度对抗菌物质活性的影响2510.图10pH对抗菌物质活性的影响2511.图11蛋白酶对抗菌物质活性的影响2612.图12抗菌物质的HPLC检测图谱2713.图13初始pH对菌株AJT抗菌活性的影响2914.图14因素总评分和极差对比3015.图15因素总评分和极差对比3216.图16Mg2+、Mn2+对菌株AJT抗菌活性的影响3217.图17吐温-80对菌株AJT抗菌活性的影响3318.表1PCR反应参数919.表2C∶N优化因素水平表1320.表3无机盐含量优化因素水平表1421.表4乳酸菌的抗菌活性1622.表5抗菌活性乳酸菌的复筛1723.表6GenBank中部分菌株16SrDNA序列同源性比较2024.表7菌株AJT的API50CHL糖发酵试验2125.表8排除酸抑制作用试验2326.表9菌株AJT的抑菌谱2427.表10抗菌物质的固相萃取2628.表11不同种类培养基对菌株AJT抗菌活性的影响2729.表12接种量对菌株AJT抗菌活性的影响2830.表13培养温度对菌株AJT抗菌活性的影响2931.表14碳源、氮源正交试验3032.表15无机盐正交试验3133.表16优化结果验证331引言随着生活水平的提高，消费者对食品质量提出了更高的要求，食品安全已成为食品工业发展的关键问题之一。出血性大肠杆菌O157:H7、单增李斯特杆菌、沙门氏杆