抗转铁蛋白受体四价抗体tfr-anti - transferrin receptor tetravalent antibody tfr.docxVIP

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2018-05-29 发布于上海
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抗转铁蛋白受体四价抗体tfr-anti - transferrin receptor tetravalent antibody tfr.docx

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抗转铁蛋白受体四价抗体tfr-anti - transferrin receptor tetravalent antibody tfr

华中科技大学硕士学位论文microscopy.Results:1.DNAsequencingshowedthatanti-TfR-scFvgenewassuccessfullysubclonedintopET28a–HSA-p53andwasinframewiththedownstreamORFoftetramerizationdomainofp53.2.Afterfourhourexpression,theproteinwasaccumulatedasinclusionbody.Aspecialproteinbandwith36kDwasfoundinSDSandwesternblot,whichwasinconformitywiththetheoreticalvalue.3.NativePAGEshowedthemolecularweightofnatureproteinwasabout144KD,whichmeantthattheproteinformedtetramericstructure.4.ResultsfromFCMandimmunoflourescencemicroscopyshowedTfR-TeAbbindingtoTfRpositivecellsmorespecificallythanTfR-scFv.Conclusions:TheprokaryoticexpressionvectorpET28(a)-TfR-TeAbwassuccessfullyconstructed.IthastheadvantageinspecificityandaviditybindingtotransferrinreceptorcomparingtoTfR-scFv.TheconstructionandexpressionofTfR-TeAbpavedourwayforfurtherresearchontumordiagnosisandtherapy.Keywordstransferrinreceptor(TfR),singlechainFv(scFv),tetravalentminiantibodyspecificallybindingtoTransferrinreceptor(TfR-TeAb),tetramerizationdomainofp53华中科技大学硕士学位论文英文缩略词TfRTransferrinreceptor(转铁蛋白受体)PCRPolymerasechainreaction（聚合酶链反应）BSABovineserumalbumin（牛血清白蛋白）TeAbTetravalentantibody(四价抗体)scFvsinglechainvariablefragment（单链抗体）CDRCompletmentaritydeterminingregion（互补决定区）DNADeoxyribonucleicacid（脱氧核糖核酸）SDSSodiumdodecylsulfate（十二烷基磺酸钠）SDSSDA-polyacrylamidegelelectrophorsis（SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳）dNTPDeoxynucleosidetriphosphate（脱氧核糖核苷酸）E.coliEscherichiacoli（大肠埃希菌）EDTAEthylendiaminotetraaceticacid（乙二胺四乙酸二钠）FCMFlowcytometry（流式细胞术）FITCFluoresceinisothiocyanate（异硫氰酸荧光素）VHVariabledomainofheavychain(重链可变区)VLVariabledomainoflightchain(轻链可变区)FRFrameworkregion（骨架区）HisHistidine（组氨酸）HRPHorseradishperoxidase（辣根过氧化物酶）IPTGIsopropylβ-D-thiogalactoside（异丙基硫代-β-半乳糖苷）KbKilobases（千个碱基）kDKilo-dalton（千道尔顿）ORFOpenreadingframe（开放阅读框）PAGEPolyacrylamidegelelectrophoresis（聚丙烯酰胺凝胶电泳）TrisTris(hydroxymethyl)aminomethane（三羟甲基氨基甲烷）PBSPhosphatebufferedsaline（磷酸盐缓冲液）独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完