拉伸应变对破骨细胞凋亡的影响及其作用机制的分析-influence of tensile strain on osteoclast apoptosis and analysis of its mechanism of action.docxVIP

下载本文档

9
0
约7.15万字
约 75页
2018-05-29 发布于上海
举报
版权申诉

拉伸应变对破骨细胞凋亡的影响及其作用机制的分析-influence of tensile strain on osteoclast apoptosis and analysis of its mechanism of action.docx

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

拉伸应变对破骨细胞凋亡的影响及其作用机制的分析-influence of tensile strain on osteoclast apoptosis and analysis of its mechanism of action

4.2材料与方法244.2.1细胞244.2.2主要试剂244.2.3主要仪器254.2.4实验试剂的配制264.2.5实验方法2RAW264.7细胞的培养及破骨细胞的诱导2破骨细胞不同强度的力学加载2线粒体膜电位测量2westernblot检测破骨细胞Bcl-2、caspase-3的表达和细胞色素C的释放2统计学处理284.3实验结果284.3.1线粒体膜电位变化284.3.2westernblot检测Bcl-2、caspase-3的表达和细胞色素C的释放294.4讨论304.5结论31第5章：结论与展望325.1结论325.2展望32参考文献34文献综述41在学期间取得的成果及发表的代表性论著（全文）48在学期间取得的成果48代表性论著(全文)49作者简历61致谢62表目录表3.1caspase-3活性测定反应体系18表3.2不同强度基底拉伸应变加载后破骨细胞hoechst染色得到的破骨细胞凋亡率19图目录图1.1Frost的力学稳态理论3图1.2课题实施方案5图2.1培养3d的RAW264.7细胞9图2.2诱导培养3d的破骨细胞9图2.3诱导培养7d的破骨细胞10图2.4TRAP染色诱导培养7d的破骨细胞10图2.5甲苯胺蓝染色显示破骨细胞形成的骨吸收陷窝11图2.6扫描电子显微镜观察破骨细胞形成的骨吸收陷窝11图3.1基底拉伸应变加载装置结构图16图3.2四点弯曲加载模式图16图3.3不同强度基底拉伸应变加载后破骨细胞hoechst染色19图3.4不同强度基底拉伸应变加载后Annexin结合实验检测破骨细胞凋亡.19图3.5不同强度基底拉伸应变加载对破骨细胞caspase-3活性的影响20图4.1不同强度拉伸应变加载后，JC-1染色法测定线粒体膜电位29图4.2不同强度拉伸应变加载后，westernblot法检测破骨细胞Bcl-2、caspase-3的表达和细胞色素C的释放30缩略词表英文缩写英文全名中文译名APAF-1ApoptosisProteaseActicatingFactor-1凋亡蛋白酶激活因子-1CASPASECysteine-requiringAspartateProtease半胱氨酸依赖的天冬氨酸蛋白酶CAIICarbonicAnhydraseII碳酸酐酶II型CKCathepsinK组织蛋白酶KcytcCytochromeC细胞色素CDMEMDulbeccominimumessentialmediumDulbecco改进的培养基ERKExtracellularsignalRegulatedKinase细胞外信号调节激酶FITCFluoresceinIsothiocyanate异硫氰酸荧光素ILInterleukin白细胞介素MAPKMitogenActivatedProteinKinase丝裂原活化的蛋白激酶M-CSFMacrophage-colonyStimulatingFactor巨噬细胞集落刺激因子MMP9MatrixMetalloproteinase-9基质金属蛋白酶9NF-κBNuclearFactorkappaB核因子κBOPGOsteoprotegrin骨保护素PAGEPolyacrylamideGelElectrophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳PBSPhosphate-BufferedSaline磷酸盐缓冲液PIPropidiumIodide碘化丙定PSPhosphatidylSerine磷脂酰丝氨酸PVDFPolyvinylideneDifluoride聚偏二氟乙烯RANKReceptorActivatorofNF-κB核因子κB受体活化因子核因子κB受体活化因子配RANKLReceptorActivatorofNF-κBLigand基SDSSodiumDodecylSulphate十二烷基硫酸钠SEMScanningElectronMicroscope扫描电子显微镜TEMEDTetramethylethylenediamine四甲基乙二胺TGFTransformingGrowthFactor转化生长因子TNFTumorNecrosisFactor肿瘤坏死因子TRAPTartrate-resistantAcidPhosphatase抗酒石酸酸性磷酸酶TrisTrishydroxymethylaminomethane三羟甲基氨基甲烷μεMicrostrain微应变拉伸应变对破骨细胞凋亡的影响及其作用机制的研究摘要研究背景和目的骨是人体重要的承重和运动器官，骨组织始终处于外界力学环境中。骨既能承受外界力学载荷，又能随着外界力学载荷的变化改变自身的形态和功能。骨重建是成熟骨组织的一种重要替换机制。力学载荷是通过骨重建过程对骨的结构和功能产生调节作用。生理状态下，骨吸收和骨形成之间形成