利用crisprcas9建立胆碱能神经元gfp特异性标记的人类胚胎干细胞系-establishment of gfp - labeled human embryonic stem cell line with cholinergic neurons by crissprcas 9.docxVIP

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利用crisprcas9建立胆碱能神经元gfp特异性标记的人类胚胎干细胞系-establishment of gfp - labeled human embryonic stem cell line with cholinergic neurons by crissprcas 9

目录第1章前言.............................................................................................................11.1胆碱能神经元的研究...................................................................................11.1.1胆碱能神经元的功能..........................................................................11.1.2与胆碱能神经元相关的疾病..............................................................21.1.3胆碱能神经元与睡眠相关方面..........................................................41.2CRISPR/Cas9技术的研究41.2.1常用基因编辑技术..............................................................................41.2.3CRISPR/Cas9的相关应用51.3Cre/LoxP与内源性启动子模型的应用6第2章实验材料......................................................................................................82.1实验设备和试剂耗材...................................................................................82.1.1实验主要设备及器材..........................................................................82.1.2试剂耗材.............................................................................................92.2抗体信息.....................................................................................................102.3引物信息.....................................................................................................112.4质粒信息.....................................................................................................122.5细胞来源.....................................................................................................14第3章实验方法....................................................................................................153.1ChAT基因序列信息获得153.2质粒构建.....................................................................................................153.2.1同源重组质粒的设计........................................................................153.2.2同源重组质粒的构建........................................................................173.2.3Cas9质粒的设计173.2.4Cas9引导序列的获得183.2.5Cas9质粒的构建193.2.6感受态转化.........................................................................

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