利用多种细胞筛选抗氧化物质方法的分析-analysis of methods for screening antioxidants by using multiple cells.docxVIP

目录中文摘要 ................................................. IAbstract ............................................... VII前言 .................................................. 1第一部分 基于 HaCaT 细胞系的抗氧化物质评价方法51 材料与方法 .......................................... 52 实验结果 ........................................... 123 讨论 ............................................... 194 结论 ............................................... 21第二部分基于原代人皮肤成纤维细胞的抗氧化物质评价方法 .. 23 1 材料与方法 ......................................... 232 实验结果 ........................................... 393 讨论 ............................................... 334 结论 ............................................... 34第三部分基于 Caco-2 细胞系的抗氧化物质评价方法351 材料与方法 ......................................... 352 实验结果 ........................................... 393 讨论 ............................................... 454 结论 ............................................... 46第四部分 EpiskinTM(中国制造)皮肤模型紫外线辐照探索实验471 材料与方法 ......................................... 472 实验结果 ........................................... 483 讨论 ............................................... 504 结论 ............................................... 52总结 ............................................. 53结论 ............................................. 57参 考 文 献 ............................................. 59综述 ............................................. 65附录............................................. 75致谢..............................................77中文摘要研究生：步犁导师：谈伟君 教授程树军 研究员研究背景：随着现代工业的发展，环境污染日益严重，日常生活中接触的氧化应激源的 种类和频率较之前有大幅增加。氧化应激机制及防护成为近年来保健品和个人护 理用品领域的研究热点。外源性的多种氧化应激源会攻击生物分子、蛋白、脂质 或核酸，造成细胞的氧化损伤，直接或间接地导致多种病理反应的出现。紫外线 照射和化学污染物造成的氧化应激与皮肤的老化、色素沉着、炎症及多种疾病的 关系已得到充分的证明。许多化妆品公司推出了多种宣称可以清除氧化自由基、 延缓皮肤衰老的产品，但对其是否能达到宣称的效果至今尚无标准化的评价方 法。另一方面，从植物提取物、化学合成、生物转录等途径获得的活性原料也需 要建立一套科学高效的筛查方法。本研究旨在建立标准化的细胞氧化损伤快速检 测方法，用于化学物或化妆品的抗氧化功效性评价。目前，对于氧化反应机制的认识尚未完全明确，但可以认为氧化损伤涉及多 通路和多基因联合作用的复杂生物学过程。其中氧化损伤过程中的一些重要的靶 细胞、限制酶、中间体和产物是关键的筛查指针和标志物。因而可根据氧化反应 的生物学机制建立抗氧化合物检测和筛查的方法。抗氧化物质研究方法可归纳为 动物模型法、人体评价法、化学检测