第6章 骨组织工程.pptVIP

生长因子的定义 生长因子(growth factor，GF)是通过细胞间信号传递影响细胞活动的一类多肽因子。它对细胞具有促进或抑制其分裂增殖、迁移和基因表达的作用。 将生长因子加入到细胞培养体系中，保证生长因子在体外环境下能够有效发挥作用非常重要。这需要解决两个难题，其一，促进生长因子维持活性；其二，保证生长因子的有效作用浓度。 生长因子的分类 根据生长因子产生细胞与接受生长因子作用的细胞相互之间的关系，可概括为以下三种模式： （1）内分泌（endocrine），生长因子从细胞分泌出来后，通过血液运输作用于远隔靶细胞。如：血小板源生长因子（PDGF）源于血小板，作用于结缔组织细胞。 （2）旁分泌（paracrine），细胞分泌的生长因子作用于邻近的其他类型细胞，对合成、分泌该生长因子的自身细胞不发生作用，因为它缺乏相应受体。 （3）自分泌（autocrine），生长因子作用于合成及分泌该生长因子的细胞本身。生长因子以后两种作用方式为主。 生长因子的分类 二、生长因子的分类 血小板源生长因子 表皮生长因子 转化生长因子 骨形成蛋白 碱性成纤维细胞生长因子 胰岛素样生长因子 结缔组织生长因子 神经胶质生长因子 血管内皮生长因子 生长因子的作用方式 生长因子的直接作用 生长因子的间接作用 生长因子的协同作用与拮抗作用 生长因子与细胞周期 研究生长因子调控的方法 动物体内实验、体外培养实验 体内实验观察生长因子作用的指标： 缺损愈合时间 新生组织的干、湿重及比值 组织总蛋白与DNA及RNA含量测定 羟脯氨酸含量测定 显微镜观察 体外培养实验观察生长因子作用的指标： 几种组织工程常用的生长因子 表皮生长因子 骨形成蛋白 神经生长因子 转移生长因子 成纤维生长因子 五、生长因子的控制释放技术 ①释放编码生长因子的 DNA转染宿主细胞； ②基 因转染离体细胞并使之在宿主体内表达相关因子 ③在修复部位直接添加生长因子； ④应用控释技术使载体包含的生长因子在体内缓慢释放 ，在一段时间内持续发挥 作用。 前两项技术目前尚处在实验室探索阶段，而将各种生长因子施加于治疗区域 已获得稳定可靠的效果 。 微胶囊的不同结构图 微胶囊化的方法 空气悬浮法、喷雾干燥法、喷雾凝冻法、 物理法 真空蒸发沉积法、静电结合法、包结络合法、 多孔离心法、 界面聚合法、原位聚合法 化学法 分子包囊法、辐射包囊法 水相分离法、油相分离法、孔膜挤压法、 物化法 熔化分散法、粉末床法、囊心交换法、 锐孔-凝固浴法、复相乳液法(干燥浴法) 凝聚法：芯材分散——壁材包覆 六 创伤修复中多种因子的贯序作用 创伤→启动凝血→活化血小板→释放血小板生长因子(PDGF)、转移生长因子(TGF) →趋向作用，吸引大量细胞，如巨嗜细胞、成纤维细胞、表皮细胞、血管内皮细胞等→每种细胞都分泌相应自己的生长因子(TGF-β、 TGF- α、PEGF、TNF) →生长因子大量释放，迅速扩散，蛋白酶降解→其他细胞趋化作用→在创伤面上分泌许多生长因子与细胞外基质，细胞外基质对生长因子即起储存作用又起促进作用→新的生长因子促进细胞局部增生→产生成纤维细胞、表皮细胞、血管内皮细胞→形成纤维结缔组织、瘢痕→胶原酶降解过量胶原消除瘢痕→修复完成 六 创伤修复中多种因子的贯序作用 骨受损→启动凝血→活化血小板→释放血小板生长因子(PDGF)、转移生长因子(TGF) →激活成骨细胞 主要内容 人体骨骼的基本组成结构及功能 骨的生长与发育 骨组织工程的细胞 骨形成的生长因子 成骨细胞的细胞社会学特性 组织工程化人工骨的临床应用 人体骨骼的基本组成结构及功能 骨的正常结构与其他结缔组织基本相似，也由细胞、纤维和基质三部分组成。按其发生和组织成分来看，属于结缔组织。骨组织最大特点是细胞间质具有大量的钙盐沉积，成为人体中最硬的组织之一，从而发挥其支架作用。 人体骨骼的基本组成结构及功能 骨的成分 （1）有机物：主要是骨胶蛋白，使骨具有一定的韧性。 （2）无机盐：主要是骨盐（主要是碱性磷酸钙），使得骨坚硬不屈、傲然挺立，是影响骨的硬度的因素。 人体骨骼的基本组成结构及功能 人体骨骼的基本组成结构及功能 有机和无机两种成分有着恒定的比例，一般而言，前者占成人骨干重的34％，后者占65％。使骨有一