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2011 年细胞生物学考研热点话题 诱导性多能干细胞 诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells, iPS cells）最初是日本人山中申弥 （Shinya Yamanaka）于2006 年 利用病毒载体将四个转录因子 （Oct4, Sox2, Klf4 和 c-Myc）的组合转入分化的体细胞中，使其重编程而得到的类似胚胎 [1] 干细胞的一种细胞类型 。随后世界各地不同科学家陆续发现其他方法同样也可以制造这种细胞。 IPS 细胞是由一些多能遗传基因导入皮肤等细胞中制造而成。在制造过程中，研究人员使用了 4 种遗传基因，同时加入了 7 种包括可阻碍特定蛋白质合成的物质和酶在内的化合物，以研究其各自的制造效率。研究结果显示，没有添加化合物时，遗 传基因的导入效率为 0.01％-0.05％，而加入了一种叫“巴尔普罗酸”的蛋白质合成阻碍剂之后，导入效率竟升至9.6％-14％。 如果从这 4 种遗传基因中排除导致细胞癌化的遗传基因，只使用 3 种基因，过去的导入效率只有 0.001％甚至更低，而加入 “巴尔普罗酸”之后，其效率也提高了约50 倍。研究人员认为，这很可能是因为“巴尔普罗酸”可以促进多能遗传基因的 活性。今后，研究人员将就添加化合物是否会使遗传基因产生变异展开研究，以在提高制造效率的同时保证安全性。 将成熟的体细胞与多潜能的细胞（ES 细胞、胚胎癌细胞等）融合，或者用胚胎干细胞提取物来处理体细胞，也可以在一定 程度上使体细胞发生重编程。 1. 利用这两种方法，可以实现某些多功能性标志分子的重新表达和多种分化潜能的获得。 2. 但是，体细胞与多能性细胞的融合率较低，融合之后的细胞具有两套染色体，并且在移植后会发生排斥现象，这就制 约了细胞融合的临床应用。 2006 年 11 月 20 日，日本京都大学的山中伸弥（Shinya Yamanaka)和美国威斯康星大学的詹姆斯 ·汤姆森（James Thomson） 分别在《细胞》和《科学》杂志上发表重量级论文，宣布他们用基因改造的手段，将人类体细胞改造成了类胚胎干细胞，在 功能上几乎可以和胚胎干细胞相媲美。 诱导产生的多功能性干细胞 2006 年，Takahashi 和 Yamnaka 将几个转录因子导入已分化的小鼠皮肤成纤维细胞，进而获得了类似于胚胎干细胞的多能 性干细胞，称之为 “诱导产生的多功能性干细胞” （induced pluripotent stem cells,iPS 细胞）。这一研究明确地证实了 分化的细胞可以通过少数几个因子的外源导入而被重编程到具有多能性的状态，因而受到了整个生命科学领域的广泛关注 成体细胞核的重编程 1.核重编程：核移植后供体核停止本身的基因表达程序，恢复为胚胎发育所必需的胚胎化基因表达程序状态。此过程包括： 染色体结构重建、DNA 甲基化、组蛋白乙酰化、印记基因表达、端粒长度恢复、X 染色体失活等。 2.重塑核结构 主要有包括核纤层 A、B、C 三种核纤层蛋白的重塑 3.细胞质重编程—miRNA miRNA 是决定细胞分化方向的因子。 细胞中 miRNA 成分的改变能提高细胞对调节基因表达重编程。 1.Oct3/4 Oct-4 （也称Oct-3）属于POU 转录因子家族的一员[1~3] 。是哺乳动物胚胎发育的一个关键的调控因子。是全能性的标志， 它能够促使 ICM 形成、维持胚胎干细胞未分化前状态并促进其增殖。 2.SOX2 基因 SOX2 基因是编码转录因子的主控基因（master genes）家族的一个成员。转录因子是些与 DNA 结合并调节其他基因表达的 蛋白质 3.癌症基因 c-MYC 癌症基因 c-MYC，是一种最容易过渡表现于人类的致癌基因，它对某些成体干细胞的自我更新起一定的作用，并可以抑制 ES 细胞的分化。 4.Klf4 - 1 - Krueppel-like factor 4，KLF4 上皮锌指转录因子 Klf4 (旧称GKLF)调节体外细胞的增生与分化 Ips 细胞的研究概况（研究方法） 这是一种具有很强创新性的研究方法：通过外源导入与多功能相关并且能使重组细胞恢复全能性的转录基因来诱导体细胞核 发生重新编程，从而使体细胞转变成多能性干细胞 这种方法所受的启示来源于 “ES 细胞-体细胞融合实验”。细胞的多能性收到许多因子精密而又复杂的调控。ES 细胞和体 细胞融合后能诱导体细胞核的重新编程，ES 细胞中存在着一些因子，这些因子对于多能性的建立可能至关重要。 Ips