两面针中七种化学成分对肿瘤细胞7404、cne抑制作用的分析-analysis of the inhibitory effects of seven chemical constituents in zanthoxylum nitidum on tumor cells 7404 and cne.docxVIP

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2018-05-28 发布于上海
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两面针中七种化学成分对肿瘤细胞7404、cne抑制作用的分析-analysis of the inhibitory effects of seven chemical constituents in zanthoxylum nitidum on tumor cells 7404 and cne

主要缩略词表英文缩写英文全称中文全称Sanguinarine血根碱NCNitidineChloride氯化两面针碱6-Ethoxychelerythrine乙氧基白屈菜红碱Skimmianine茵芋碱Dictamnine白鲜碱Decarine德卡林碱Sesamine芝麻素FBSFetalBovineSerum胎牛血清PBSPhosphateBufferSolution磷酸缓冲液OD值OpticalDensity光密度值HPLCHighPerformanceLiquidChromatography高效液相色谱法MinMinute分钟hHour小时RPMI1640细胞培养基DMSODimethylsulfoxide二甲基亚砜MTT3(4,5-demethylthiazole-2-yl)-2,5-diphenyletrazolium-bromide3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐，四甲基噻唑蓝中文摘要目的：以两面针[Zanthoxylumnitidum(Roxb.)DC.]药材中血根碱、氯化两面针碱、乙氧基白屈菜红碱、茵芋碱、白鲜碱、德卡林碱、芝麻素为研究对象，通过对各成分进行含量测定，同时结合药效筛选追踪，研究两面针药材中抗肿瘤活性成分、含量与药效之间的关系以及如何有效的增强其抗肿瘤活性，为开发具有抗肿瘤活性的新的药用资源提供科学依据。方法：（1）通过HPLC法对广西不同产地两面针根中血根碱、氯化两面针碱、乙氧基白屈菜红碱、茵芋碱、白鲜碱、德卡林碱、芝麻素七种成分进行含量测定，获得了各自含量范围。（2）运用MTT法分别取对数生长期的肝癌BEL-7404、鼻咽癌CNE两种细胞株，进行血根碱、氯化两面针碱、乙氧基白屈菜红碱、茵芋碱、白鲜碱、德卡林碱、芝麻素七种成分的体外生长抑制筛选研究，获得七种化学成分对肝癌BEL-7404、鼻咽癌CNE两种细胞的IC50值。（3）结合（1）下两面针中血根碱、氯化两面针碱、乙氧基白屈菜红碱、茵芋碱、白鲜碱、德卡林碱、芝麻素的含量数据，同时运用MTT法分别取对数生长期的细胞株肝癌BEL-7404、鼻咽癌CNE两种进行成分单独使用以及含有各成分的复方药物的体外生长抑制研究，获得各成分单独使用以及对整体活性的影响。（4）通过MTT法测定氯化两面针碱与其余六种成分两药合用，对BEL-7404、CNE两种肿瘤细胞株进行体外抑制生长研究，同时运用“金（正均）公式法”计算两药联用指数，获得氯化两面针碱与各药物在各浓度配比的两药联用指数。结果：（1）两面针根中七种化学成分的含量分别为：血根碱（0.015~0.44mg/g）、氯化两面针碱（0.25~2.30mg/g）、乙氧基白屈菜红碱（0.51~10.05mg/g）、茵芋碱（0.022~0.30mg/g）、白鲜碱（0.062~0.42mg/g）、德卡林碱（0.047~0.37mg/g）、芝麻素（0.20~3.25mg/g）。（2）七种化学成分对鼻咽癌CNE、肝癌BEL-7404细胞的IC50值分别为：血根碱（8.22、7.69μg/ml）、氯化两面针碱（5.50、1.44μg/ml）、乙氧基白屈菜红碱（17.57、16.96μg/ml）、茵芋碱（14.76、4.67μg/ml）、白鲜碱（98.89、100.90μg/ml）、德卡林碱（9.58、30.70μg/ml）、芝麻素（14.56、24.30μg/ml）。（3）在实验浓度范围内，与单用组比较，乙氧基白屈菜红碱、茵芋碱对鼻咽癌CNE细胞增殖的抑制作用高于单用组（P0.05）;氯化两面针碱、白鲜碱、德卡林碱、芝麻素对鼻咽癌CNE细胞增殖的抑制作用明显高于单用组（P0.01）。与单用组比较，氯化两面针碱对肝癌BEL-7404细胞增殖的抑制作用低于单用组（P0.05）；血根碱对肝癌BEL-7404细胞增殖的抑制作用高于单用组（P0.05）;乙氧基白屈菜红碱、白鲜碱、德卡林碱、芝麻素茵芋碱对肝癌BEL-7404细胞增殖的抑制作用明显高于单用组（P0.01）。（4）在氯化两面针碱在实验浓度范围内，与下面六种成分两药合用对CNE、BEL-7404两种肿瘤细胞的联用指数CI分别为：血根碱（0.85~1.06、0.95~1.50）、乙氧基白屈菜红碱（0.81~1.18、0.87~1.06）、茵芋碱（0.77~0.94、0.75~0.89）、白鲜碱（0.91~1.56、1.05~1.25）、德卡林碱（1.16~1.46、1.10~1.19）、芝麻素（1.08~1.54、0.94~1.08）。结论：以上研究表明，两面针药材的药效是各成分之间相互作用、相互影响的综合体现，将化学成分的含量与药效相结合更能阐明两面针药材的质量。两面针药材七种成分中，对鼻咽癌CNE细胞增殖抑制有效成分为：氯化两面针碱、德卡林碱、血根碱