兽医临床免疫学及习绪论验室注意及菌种（株）存验室内感染...pdfVIP

國立嘉義大學 獸醫學系 魚病研究室 王建雄 獸醫臨床免疫學講義 獸醫臨床免疫學及實習 緒論 實驗室注意事項及菌種 （株 ）保存 實驗室內感染及其預防 實驗室感染之預防 常備消毒水 菌種 （株 ）保存Maintenance of Stock Culture 臨床檢驗的品質保證 第一章 緒論 免疫學 （Immunology ） ：係研究動物（宿主 ）對病原體之自然及後天性抵抗力的一種科 學。最早受人注意的免疫現象為 smallpox ，因曾受天花感染之患者，痊癒後絕不再度感染。 動物的免疫分為體液性免疫和細胞性免疫 （humoral and cellular Immunity）。獸醫臨床免疫學 診斷技術，主要介紹利用免疫學之原理及技術，來診斷禽畜之疾病。因此，又可稱為免疫學 診斷技術（Technics of Immunoassay）。 臨床免疫學診斷主要以血清 （serum ）為檢體 （sample ），測定在體外 （in vitro ）的抗原 及抗體間之反應，通常用已知的抗原 （即病原體）去測定血清中的特異性抗體是否存在，藉 以輔助疾病的診斷。由於抗體主要存於血清中，所以也可稱為血清學 （Serology ）。 非專一性免疫 （non-specific immunity） 專一性免疫 （specific immunity ，適應性免疫反應 adaptive immune response ） 被動免疫 主動免疫 診斷的方法 ： （一）疾病的鑑別診斷 （確診 ） ：凡以檢出抗原為目的之診斷方法均為確診方法，如 ： 1.直接螢光抗體試驗 （direct fluorescent antibody test ，DFA test ） ： 係採用已知的特異性抗體並加以標示螢光色素，使之成為結合體 （conjuate ）。 即螢光標示抗體，以此檢出未知的抗原，常用的病材來自冷凍切片或組織切片等。 本法應用最廣 Ab + 螢光色素 （FITC ）→ 標示抗體 Ab* 標示抗體 （Ab* ）+ 抗原 （Ag ）→ 於螢光顯微鏡下有特異性螢光 Ag-Ab* 已知 未知 FITC （Fluorescein isothiocyanate ） ：為一種螢光色素，本色素有很強的綠黃色螢光，目前 以此種色素的螢光效率、穩定性及蛋白結合力最好。 01 緒論.doc 1 國立嘉義大學 獸醫學系 魚病研究室 王建雄 獸醫臨床免疫學講義 2.西方氏轉漬法 （Western Blotting assay） ： 將病材 （若含有蛋白物質之抗原存在時 ），將此病材經 SDS電泳後 轉漬到硝化纖維紙 （Nitrocellulose membrane ）上，再以特異性抗體檢出抗原，經由第二 抗體反應後，以特殊方法呈色後，加以判讀之。 利用 SDS電泳 → NC paper （Nitrocellulose membrane ）。 3.免疫過氧化 - ABC 法 （Immunoperoxidase- ABC method ） ：亦是以檢出抗原為目的，故 可用做確診之方法。 4. Ag - Capture ELISA （Enzyme - linked immunoabsorbent assay ） 【註】檢出特異性 Ig M ： 因為動物在感染疾病之後，最先出現的抗體是 Ig M ，；然後再產生 Ig G 。因此檢出特 異性 Ig M 抗體者，則可做為確診 （即最近才感染）。 5. 早期診斷癌症及對癌症的轉移、復發等的病程追蹤 肝癌 （卵巢癌、睪丸癌）的－胚胎癌蛋白 （α-fetoprotein ）、大腸癌的CEA （carcinoembryonic antigen） （二）輔助診斷：凡以檢出Ab （IgM之外）為目的者，可做為疾病診斷之輔助診斷之用，例 如間接螢光抗體試驗 （Indirect fluorescent antibody test, IFA test ） ： 係採用已知的抗原與未知的被檢血清作用，以檢測血清中之 Ig G