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维生素E脂质体制备工艺筛选优化及其性质研究 　　摘要：目的优化维生素E(v。)脂质体的制各工艺并考察其性质。方法采用乙醇注入法、乙醚注入法、逆相蒸发法、薄膜水化法和复乳法分别制备v。脂质体，以包封率和保留率为考察指标，选择最优制备方法；经L9(34)正交试验设计优化选择，确定脂质体的最佳配方。结果薄膜水化法制备所得的脂质体包封率最高，vE保留率较高；用薄膜水化法制备脂质体的最佳配方为磷脂：VE：胆固醇20：0.8：1.5；用透射电镜观察最佳实验组VE脂质体发现其具有指纹状结构，Zeta电位-为30.9±0.9 mV，平均粒径为33.7 rim。结论薄膜水化法制得的v。脂质体具有包封率高，v。保留率高，粒径均匀等特点。 　　关键词：维生素E；脂质体；制备工艺；性质 　　中图分类号：R977.2+5 　　文献标识码：A 　　文章编号：1672-979X(2012)03-0095-05 　　收稿日期：2011―10―15 　　基金项目：国家基金委国际合作(中韩)交流项目(40911140282)；国家自然科学基金项目；国家国际科技合作(中韩)项目(2011DFA31270)；省重大科技成果转化项目(BA2010112)；中央高校基本科研业务费专项资金资助(841111042，201213006) 　　作者简介：党奇峰(1982―)，女，山东潍坊人，讲师，主要从事海洋生物材料的研究 　　通讯作者：刘成圣，教授E.mail：liucs@ouc.省略. 　　维生素E(vitamin E,VE)又称生育酚，是主要存在于植物油如麦胚油、玉米油、大豆油中的一种脂溶性维生素。V。能有效地捕捉机体代谢过程中产生的自由基，如羟基自由基、过氧化物自由基、超氧离子自由基等，使苯并吡喃环上的酚基失去一个氢原子而形成生育酚自由基，生育酚自由基又可进一步与另一自由基反应生成非自由基产物一生育酚。因此VE是动物和人体中有效的抗氧化剂。但是，VE有对光和热敏感、极易氧化、水溶性差，生物利用度低等缺点。脂质体(1iposome)在食品、化妆品和医药领域逐渐显现出巨大的应用潜能。采用脂质体包埋VE能增强其稳定性，并能改善其水溶性，提高生物利用率。近年，虽然对VE脂质体制备工艺的研究取得了一定的进展，但仍然存在很多问题，比如包封率低、稳定性差、粒径分布不均匀等。为了寻求包封率高、稳定性好的VE??质体制备方法，本文分别采用乙醇注入法、乙醚注入法、逆相蒸发法、薄膜水化法和复乳法制备VF脂质体，以包封率和保留率为考察指标，选出最优的制备方法，用正交试验设计优化选择该方法，并研究了最佳实验组vE脂质体的性质。 　　1材料和设备 　　1.1材料 　　蛋黄卵磷脂(99％，国药集团)；二棕榈酰磷脂酸(DPPA，99％，德国Lipoid)；磷脂酰丝氨酸(PS，99％，德国Lipoid)；混合磷脂(20％DPPA，10％Ps，70％蛋黄卵磷脂，自制)；胆固醇(99％，Sigma)；VE(医药级，国药集团)。 　　1.2设备 　　MB99―2A自动液相色谱分离层析仪(上海沪西)；RE，52AA旋转蒸发器(上海亚荣)；HL-2流泵(上海沪西)；Zetasizer2000激光衍射粒度分析仪(英国马尔文)；UV-2802PCS紫外／可见分光光度计(尤尼柯)；透射电镜(TEM，100CXII，日本电子公司)。 　　2方法 　　2.1 VE脂质体的制备 　　V。脂质体的整个制备过程都处于避光条件下。 　　2.1.1乙醇注入法参考成差群等的方法并加以改进，精确称取0.08 g混合磷脂，0.007 5 g胆固醇，0.004 g VE注入4 mL／,醇中，30℃下搅拌，充分溶解后用注射器将其快速注入盛有10 mL pH 5.8的磷酸缓冲液(PBS 5.8)的圆底烧瓶，磁力搅拌30 min后常压下旋转蒸发除去乙醇，得大型脂质体混悬液。将其转移到西林瓶中冰水浴超声(750 w，20 kHz，ls／2s)8min，磁力搅拌15 min得小粒径脂质体混悬液。 　　2.1.2乙醚注入法方法同2.1.1，将乙醇替换为乙醚。 　　2.1.3逆向蒸发法根据李可欣等的方法加以改进，精确称取0.08 g混合磷脂，0.007 5 g胆固醇，0.004 gv。，加入4 mL三氯甲烷搅拌至完全溶解，减压除去三氯甲烷，在圆底烧瓶内壁形成均匀的脂质薄膜。加入3mLT,醚，溶解脂质膜，然后加入10 mLPBS 5.8并充氮。冰水浴超声至混合溶液形成单相体系，室温减压条件旋转蒸发除去有机溶剂。此过程中，首先逐渐形成高黏度凝胶粘在烧瓶内壁，继而凝胶逐渐崩溃，继续减压蒸发5~10 min即形成大型脂质体悬浊液。将其转移至体积约20 mL直径相同的小瓶中冰水浴超声(750w，20