PCR检测转基因大豆玉米pp.pptVIP

实验九 PCR扩增检测转基因大豆、玉米 【实验目的】 通过PCR扩增方法检测市场常见大豆、玉米产品是否含有转基因成分 培养学生的实验设计能力和创新能力 【实验原理】 【实验步骤】大豆、玉米DNA 提取--改良的CTAB法 称取0.1g样品，在研钵中充分研磨。加入1000μL CTAB提取液，继续研磨充分后加入到1.5mL Ep管中；向EP管加入4μL RNaseA，至于65℃水浴，过程中混匀3~5次，30min，12000r/min室温离心10min；取上清于新的Ep管中，加入等体积氯仿：异戊醇(24: 1)，轻缓颠倒数次(或至于漩涡震荡器上混匀)，室温静置5min，室温12000r/min离心10min；重复加入氯仿异戊醇一到两次 (过程中如上清液量太少，可适量加入三重蒸馏水)；取上清于新的Ep管(千万不要吸入下层液体)，再加入等体积的CTAB沉淀液，轻缓颠倒混匀后室温静置1h，15000 r/min室温离心10min；弃上清液，加入400μL 1.2mol/L氯化钠溶解沉淀，56℃温浴15min，期间轻摇EP管数次助溶；加入800μL -20℃无水乙醇，-20℃静置1h，15000 r/min室温离心10min；弃上清液，用75%乙醇洗涤沉淀两三次后，在室温下自然风干用三重蒸馏水溶解储存于4℃。 【实验步骤】基因组DNA浓度和纯度的鉴定 取5μL样品溶于95μL三重