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转基因生物和基因打靶 转基因动物 转基因植物 基因打靶 转基因动物(transgenic animal) 用人工方法将外源基因导入或整合到基因组内，并能稳定传代的一类动物 特点 分子及细胞水平操作，组织及动物整体水平表达 基本原理 目的基因 显微注射 受精卵或胚胎细胞 整合 植入输卵管 外源基因：顺式作用元件 结构基因 报告基因(report gene) 融合基因 基本方法 显微注射法 胚胎干细胞法(embryonic stem cells,ES细胞) 逆转录病毒感染法 精子载体法 转基因动物中外源基因的检测 染色体及基因水平：斑点杂交、Southern杂交、PCR 转录水平：Northern杂交 蛋白质水平：Western印迹 转基因动物的应用 基因特异表达的研究 发现基因的新功能 发现新基因 建立基因表达、调控的动物模型 建立人类疾病的动物模型等 转基因植物(transgenic plant) 基本方法 获得目的基因 受体细胞培养：如植物愈伤组织等 目的基因导入受体细胞 培养转化细胞 筛选、培植、鉴定 农杆菌介导的基因转移： 冠瘿瘤 Ti质粒(tumor-in-ducing plasmid) 转移DNA(transfer DNA,T-DNA) 转基因植物在医学上的应用 生产药用蛋白 生产新的疫苗等 转基因植物的安全性探讨 基因打靶(gene targe