植物类生长激素—赤霉素的发酵生产及分离纯化与各参数的测定实验..docxVIP

植物类生长激素—赤霉素的发酵生产及分离纯化与各参数的测定实验一、赤霉素的分批发酵实验目的： 1、学会发酵罐过程操作 2、掌握发酵液中氨基酸、还原糖、总糖和赤霉素含量测定方法。实验原理：赤霉素工艺流程图：菌种制备→→→一级培养→→→二级培养→→→发酵培养发酵液预处理→→→过滤→→→浓缩→→→萃取→→→脱脂 重结晶→→→产品实验步骤：1、培养基的配制与灭菌 种子培养基：察氏培养基（硝酸钠 3g 磷酸氢二钾 1g 硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0.5g 氯化钾 0.5g 硫酸亚铁 0.01g 蔗糖 30g 琼脂 20g 蒸馏水 1000mL 制法 加热溶解，分装后121℃灭菌20min。） 发酵培养基：马铃薯培养基、大米斜面培养基和槐树枝斜面培养基。2、种子活化与扩大培养3、发酵罐的灭菌与接种4、发酵工艺控制二、赤霉素含量标准曲线的测定实验目的：熟练掌握赤霉素含量标准曲线的测定方法实验原理：赤霉素在加热条件下能使Fe3+还原产生Fe2+，Fe2+与邻菲罗啉形成红色络合物，然后在分光光度计下测定吸光度。实验器材： 水浴锅、比色管、比色皿、pH=5的HAc-NaAc缓冲溶液、lNaF溶液、邻菲罗啉溶液、Fe3+溶液、分光光度计。实验过程：每隔一段时间取一定量的发酵液于25ml比色管中，依次准确加入3.00mlFe3+溶液和4.00ml邻菲罗啉溶液，摇匀