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分子克隆实验技术
分子克隆实验技术 汇 报 人:宋菲菲 预防兽医学 200903602 汇报内容 基本原理 克隆(clone) 是指通过无性繁殖过程所产生的与亲代完全相同的子代群体。 分子克隆(Molecular Cloning)是在体外对DNA分子按照既定的目的和方案进行人工重组,将重组分子导入到合适的受体细胞中,使其在细胞中扩增和繁殖,以获得DNA分子大量复制,并使受体细胞获得新得遗传特征的过程。 基本原理:将编码某一多肽或蛋白质的基因(外源基因)组装到细菌质粒(质粒是细菌染色体外的双链环状DNA分子)中,再将这种质粒(重组质粒)转入大肠杆菌体内,这样重组质粒就随大肠杆菌的增殖而复制,从而表达出外源基因编码的相应多肽或蛋白质。 应 用 LOGO Edit your company slogan LOGO 基 本 原 理 1 技 术 路 线 2 基 本 步 骤 3 应 用 4 载体DNA (vector) 目的DNA (target fragment) 重组DNA (recombinant DNA ) 宿主(host) 筛选、扩增 克隆(clone) 技 术 路 线 DNA 重组 转化 基因克隆的基本步骤 粘性末端 质粒 目的基因 粘性末端 匹配的粘性末端 酶切后的目的基因片段 连接后的重组质粒DNA分子 重组质粒 目的基因 大肠杆菌 染色体 真好玩! 分解抗生素的酶 含抗生素的培养基 还活着! 玩完啦! 大肠杆菌 大肠杆菌 大量生长 提取大量质粒 酶切鉴定 基因治疗 冶金、环保、轻工、食品 基因诊断 多肽药物、疫苗、抗体 转基因植物 转基因动物 应用 LOGO
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