丙戊酸钠对人脑胶质瘤细胞系shg-44的放疗增敏作用及其机制研究-radiosensitization effect of sodium valproate on human glioma cell line shg - 44 and its mechanism.docxVIP

目录前言..................................................................1实验材料................................................................2实验方法和步骤..........................................................4结果.................................................................11讨论.................................................................17结论.................................................................20参考文献...............................................................21综述.................................................................23中英文缩写词表.........................................................34攻读学位期间公开发表的论文.............................................36 致谢.................................................................37丙戊酸钠对人脑胶质瘤细胞系 SHG-44 的放射增敏作用及其机制研究前 言前言胶质母细胞瘤是成年人中最为普遍的恶性胶质瘤，具有高度异质性、侵袭性等生 物学特征，尽管近年在其治疗上取得一定进展，手术、放化疗及靶向治疗综合治疗的 运用下，其预后仍然很差，总的中位生存期不超过 15 个月[1]，五年生存率低于 10%。 由于局部复杂的解剖结构，手术常常难以达到良好的局控，而残留的肿瘤将导致局部 复发，术后辅助治疗必不可少，然而血脑屏障对进入脑组织物质的筛选作用，阻碍了 治疗药物到达病灶，使得目前化疗药物对胶质瘤的作用仍然有限，局控作为治疗失败 的主要原因、作为胶质瘤治疗厄待解决的问题，显得尤为重要，放疗这一局部根治手 段，作为胶质瘤治疗不可或缺的重要组成部分，发挥着显著作用，然而胶质母细胞瘤 具有高度异质性、侵袭性等生物学特征，放疗的单纯运用治疗效果仍然不满意，放化 疗联合虽然提高了肿瘤局控，但广泛的毒副作用不能为临床接受。丙戊酸钠曾作为神经系统的一类药物，被广泛用于癫痫及精神行为异常患者的治 疗[2]。多年来临床运用，证实其为一类安全有效的临床药物，低毒、耐受力好及能 够通过血脑屏障等优点，使得丙戊酸钠得到广泛的临床认可，近些年来发现丙戊酸钠 具有抑制组蛋白去乙酰化酶的作用[3]，组蛋白去乙酰化酶(Histone deacetylase HDAC ) 是由美国哈佛大学的taunton 等[4]于1996年发现，是一种催化切除来自赖氨酸残基上 乙酰基的酶，在多种肿瘤细胞中表达增高[5]，作为调节组蛋白去乙酰化程度的一种 方式，组蛋白去乙酰化在调节染色质结构和基因表达方面起重要作用，这两方面长期 以来一直被认为在放疗反应中起决定性作用，目前一些组蛋白去乙酰化酶抑制剂已经 显示了在体外能够增强来自实体瘤的肿瘤细胞系的放疗敏感性，此外，组蛋白去乙酰 化酶抑制剂能够增强人类肿瘤移植物的放疗敏感性。虽然放疗增敏作用具体机制没有 明确阐明，但已有一些数据显示抑制放疗诱导的DNA损伤修复作用可能参与其中。一 时间丙戊酸钠在放疗的敏感性方面的作用引起了广泛的兴趣。而丙戊酸钠作为神经系 统的一类药物，其透过血脑屏障的优点，使其在脑胶质瘤治疗中运用更显突出，本实 验研究丙戊酸钠对胶质瘤细胞系SHG-44放疗敏感性的作用，并对其可能机制进行探 讨。实验材料丙戊酸钠对人脑胶质瘤细胞系 SHG-44 的放射增敏作用及其机制研究实验材料1、肿瘤细胞株人脑胶质瘤细胞系 SHG-44 细胞由苏州大学附属第四医院细胞库提供；2、药物及其主要试剂、耗材高糖 DMEM 培养基：Gibco 公司 胎牛血清：南京凯基生物公司 0.25%胰酶溶液：北京碧云天公司 细胞培养板：北京碧云天公司 无菌磷酸盐缓冲液（PBS）：北京碧云天公司 二甲基亚枫（DMSO）：南京凯基生物公司 四甲基偶氮唑蓝（MTT）：南京凯基生物公司 Giemsa 染色：南京凯基生物公司 细胞周期检测试剂盒：南京凯基生物公司 TRIzol