塞拉菌素制剂豚鼠最大化试验和Buehler试验.docVIP

塞拉菌素制剂豚鼠最大化试验和Buehler试验 　　摘要：为检验塞拉菌素制剂对皮肤的过敏性，以化学药物指导原则为指导，进行了豚鼠最大化试验（ＧＰＭＴ）和Ｂｕｅｈｌｅｒ豚鼠封闭斑贴试验（ＢＴ）。用２，４－二硝基氯苯溶液作为阳性对照物，在ＧＰＭＴ试验和ＢＴ试验的阳性对照组的致敏率分别为８０％和７０％，对豚鼠的致敏率较高，２个试验受试物组的致敏率均为０，表明塞拉菌素对豚鼠没有致敏性。 　　关键词：塞拉菌素；豚鼠；斑贴试验；最大化试验 　　中图分类号：Ｒ９７８．１文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）08－1650-03 　　 　　Ｇｕｉｎｅａ Ｐｉｇ Ｍａｘｉｍｉｎａｔｉｏｎ Ｔｅｓｔ ａｎｄ Ｂｕｅｈｌｅｒ Ｔｅｓｔ ｆｏｒ Ｓｅｌａｍｅｃｔｉｎ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ 　　 　　ＷＡＮＧ Ｆａｎｇ，ＺＨＡＮＧ Ｊｉ－ｙｕ，ＺＨＯＵ Ｘｕ－ｚｈｅｎｇ，ＬＩ Ｊｉｎ－ｓｈａｎ，ＬＩ Ｊｉａｎ－ｙｏｎｇ，ＬＩ Ｂｉｎｇ，ＮＩＵ Ｊｉａｎ－ｒｏｎｇ， 　　ＷＥＩ Ｘｉａｏ－ｊｕａｎ，ＹＡＮＧ Ｙａ－ｊｕｎ 　　（Ｌａｎｚｈｏｕ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ， Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｌａｎｚｈｏｕ ７３００５０， Ｃｈｉｎａ） 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｏ ｍｅａｓｕｒｅ ｔｈｅ ｓｋｉｎ ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ， ｔｈｅ ｇｕｉｎｅａ ｐｉｇ ｍａｘｉｍｉｎａｔｉｏｎ ｔｅｓｔ （ＧＰＭＴ） ａｎｄ Ｂｕｅｈｌｅｒ ｔｅｓｔ （ＢＴ） ｆｏｒ ｓｅｌａｍｅｃｔｉｎ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｇｕｉｄａｎｃｅ ｏｆ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｍｅｄｉｃｉｎｅ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ｗｈｉｃｈ ｕｓｅｄ ２，４－ｄｉｎｉｔｒｏｃｈｌｏｒｏｂｅｎｚｅｎｅ ｓｏｌｕｔｉ???ｎ ｉｎ ＧＰＭＴ ｔｅｓｔ ａｎｄ ＢＴ ｔｅｓｔ ｗａｓ ８０％ ａｎｄ ７０％， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ； while ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｔｈｅ ｔｅｓｔ ｇｒｏｕｐ ｉｎ ｂｏｔｈ ｔｅｓｔｓ ｗｅｒｅ ｚｅｒｏ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｐｒｏｖｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｅｌａｍｅｃｔｉｎ ｔｏ ｇｕｉｎｅａ ｐｉｇｓ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｓｅｌａｍｅｃｔｉｎ； gｕｉｎｅａ ｐｉｇ； Bｕｅｈｌｅｒ ｔｅｓｔ； maximination text 　　 　　塞拉菌素是由基因重组的阿维链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｖｅｒｍｉｔｉｌｉｓ）新菌株发酵而成的阿维菌素类抗生素，是一种兼具抗体内、体外寄生虫双重作用的新型广谱抗寄生虫药［１］，对蜱、螨、蚤、虱、恶丝虫、部分线虫有驱杀效果［２－７］。该药目前主要被开发为犬猫专用的透皮制剂，为研究该制剂的皮肤过敏性，试验进行了豚鼠最大化试验和封闭斑贴试验。 　　１材料和方法 　　１．１供试药品 　　塞拉菌素制剂，规格45mg∶0.75mL，购至浙江海正药业股份有限公司；０．１％和１％的２，４－二硝基氯苯溶液（上海中秦化学试剂有限公司）。 　　１．２试验动物 　　成年白色豚鼠，未孕雌性，体重２５０～３００ ｇ。每次给药前２４ ｈ给豚鼠肩背部脱毛，面积为３ ｃｍ×３ ｃｍ。试验完后称量动物体重。 　　１．３试验方法 　　１）预试验。皮内注射试验：随机选取试验动物１６只分为４组，每组４只，于每只豚鼠肩背部去毛区分４点一次性皮下给予不同剂量的塞拉菌素溶液，给药点间距１．５ ｃｍ，给药后２４ ｈ和４８ ｈ观察注射点红斑、水肿和溃烂情况。各试验组注射剂量分别为０．２ ｍＬ、０．１ ｍＬ、０．０５ ｍＬ、０．０１ ｍＬ。选取注射点皮肤不产生溃烂的剂量为皮内注射剂量。 　　豚鼠封闭斑贴试验：随机选取试验动物１６只分成４组，每组4只，于每只豚鼠肩背部去毛区一次性斑贴不同剂量的塞拉菌素溶液，封闭贴敷２４ ｈ，进行激发接触。在去除受试物后的１２ ｈ内观察动物去毛区皮肤红斑水肿情况。各试验组剂量分别为０．５ ｍＬ、０．２５ ｍＬ、０．１ ｍＬ、０．０５ ｍＬ。选取可产生轻度刺激性的剂量作为第一次斑贴剂量，选取不产生刺激性的最大剂量作为第二次斑贴剂量。斑贴试验操作：用医用凡士林涂皮，将药物吸附在１ｃｍ×１ｃｍ的滤纸上贴敷于皮肤表面，用塑料薄膜（保鲜膜）覆盖