应用体内诱导的抗原技术(IVIAT)筛选结核杆菌免疫分子新靶位.pptVIP

* * * 应用体内诱导的抗原技术(IVIAT)筛选结核杆菌免疫分子新靶位 目的 由于结核病死灰复燃、耐多药结核病出现、卡介苗保护的不确定性，使得控制结核病的两条途径—治疗和预防捉襟见肘，所以必须另辟蹊径，寻找新的抗结核药物和疫苗来摆脱目前的困境。1998年，法国的巴斯德研究所完成了结核分枝杆菌标准株H37Rv全序列的测序工作，从而也使结核病的研究迈入了后基因组时代，这使得在分子水平设计新的抗结核药和新疫苗提供了可能。本课题拟采用体内诱导的抗原技术（in vivo induced antigen technology, IVIAT），构建结核分枝杆菌标准株H37Rv及临床分离株的基因组表达文库并诱导此表达文库，使基因文库中的基因表达为蛋白质，用结核病患者血清筛选基因组表达文库，得到结核杆菌只在进入人体后特异表达的基因克隆，剔除在体外培养正常生长所表达的基因,找到结核杆菌在进入人体后特异表达的与免疫和致病相关的关键基因，作为今后结核病免疫诊断、研制抗结核新药和新型疫苗研发的分子靶位。 材料和方法 ①收集初治肺结核病患者血清。以前从未进行过抗结核药物治疗的肺结核病患者体内繁殖的结核杆菌没有接触过药物，它的基因表达谱保持了最原始的状态； ②用体外培养的结核杆菌对收集的血清进行吸收。此步骤的目的是去除血清中存在的与结核杆菌体外生长相关的基因产物；